人外周血淋巴细胞分离液使用说明

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1、人外周血淋巴细胞分离液LymphocyteSeparationMedium(Human)编号名称规格单位北京华越洋GH5003人外周血淋巴细胞分离液200ml瓶英文名称:LymphocyteSeparationMedium(Human)别名:人淋巴细胞分离液人外周血淋巴细胞分离液简介：外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和粒细胞密度较大，为1.090g/ml左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090g/ml，血小板为1.030～1.035g/ml。为此，将葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例

2、混合，调整比重、pH值和渗透压，经过澄清及过滤除菌后制成一种密度在1.077g/ml并且近于等渗的溶液（分层液），经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。本试剂为带有乳光或微乳光的注射水溶液，主要组成成份是葡聚糖（右旋糖酐）与泛影酸葡甲胺。适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞（主要为淋巴细胞），无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。分离方法说明及图例：取新鲜抗凝血1ml，与生理盐水1:1混匀后，小心加于2ml细胞分离液之液面上；以400g（约1500转/分，半径15cm水平转子）离心20分钟，此时离心管中由上至下细胞分四层

3、。第一层：为血浆层。第二层：为环状乳白色淋巴细胞层。第三层：为透明分离液层。第四层：为红细胞层。收集第二层细胞放入含生理盐水4-5ml的试管中，充分混匀后，以400g（约1500转/分）离心20分钟。沉淀经2次洗涤后即得所需淋巴细胞。注：提取率约为80%。人外周血淋巴细胞分离液注意事项：A．本分离液要求血液为新鲜抗凝血，避免冷冻和冷藏；在收集血液和分离过程中，应注意无菌操作，避免微生物污染。B．本实验要求，在正常大气压下，分离液、分离样本以及分离环境温度为20℃±2℃。分离液在低温时呈较高密度，在高温时呈较低密度。细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，操作前可

4、将样本和分离液置于20℃水浴中复温20分钟以保证分离温度。C．由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季的差异，可能影响分离效果，用户可以调节离心转数和离心时间，摸索最佳的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。D．最好使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。E．最优抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。性能指标：密度1.077±0.001g/mlpH7.0-7.5渗透压280-340mOsmol/kg内毒素≤0.5EU/ml无菌直接接种培养14天后培养基澄清澄明度及不溶性颗粒物每50ml溶液中

5、含10μm以上的不溶性微粒20粒以下，含25μm以上的不溶性微粒5粒以下人外周血淋巴细胞分离液贮藏及保存期限：本分离液是敏光型的，应在18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，若保证无微生物污染，4℃可长期保存。保存温度较低（10℃以下）时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。人外周血淋巴细胞分离液相关：Percoll细胞分离液小鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒大鼠外周血淋巴细胞分离液试剂盒兔外周血淋巴细胞分离液试剂盒狗外周血淋巴细胞分离液试剂盒鸡外周血淋巴细胞分离液试剂盒人外周血中性粒细胞分离液试剂盒人外周血白细胞分离液试剂盒大鼠脾脏NK细胞分离液试

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