蒲公英抑菌的研究进展

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1、蒲公英抑菌的研究进展张忠(通讯作者)张洪峰聂尚芬王乐平陈晨魏亚超(河北省邯郸市中心医院药剂科河北邯郸056001)【中图分类号】R969【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)17-0050-03【关键词】蒲公英抑菌研究进展蒲公英是一味重要的清热解毒类常用中草药，为菊科植物蒲公英的干燥全草。性寒，味苦、甘，入肝胃二经。具有清热解毒、消肿散结和利尿通淋的功效。常用于治疗乳痈、瘵病、疔疮肿毒、咽痛、肺痈、肠痈、目赤、湿热黄疸、热淋涩痛等症。药理试验证明，蒲公英具有广谱抗菌、保肝利胆、抗内毒素、健胃和免疫促进作用［1,2］。近年来

2、，人们在蒲公英植物种类、化学成分、药理作用、临床应用和开发利用等方面作了大量研究，取得了很大成就。1蒲公英的抗菌作用蒲公英具有广谱抑菌作用，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌、螺旋体和病毒均有不同程度的抑制作用，其中对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和卡他及溶血性链球菌有较强的杀灭作用［3］。蒲公英的热水煎剂对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、变形杆菌、痢疾杆菌及绿脓杆菌亦有较强抑制作用［4］。木品煎剂或醇提物对结核杆菌、炭疽杆菌、单纯疙疱疹病毒、ECHOII病毒、钩端螺旋体、各种皮肤真菌和幽门螺杆菌有抑制作用［59。蒲公

3、英煎剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.5g/mL,溶液用于金黄色葡萄球菌后形态学、甘露醇发酵、血浆凝固酶试验均无明显改变，说明这些药物在低浓度时主要是抑制细菌的牛长及蛋白质合成。而当药物去掉后细菌仍可牛长繁殖，表现出原有形态和牛物学特征。蒲公英的最小杀菌浓度(MBC)为lg/ml,可使金黄色葡萄球菌的细胞膨大，细胞壁增厚，核糖体聚集成块，有的细胞壁破裂，胞质渗出。说明蒲公英的抗菌作用机制一方面是通过抑制细胞壁合成，另一方面是通过抑制蛋白质和DNA的合成来实现的［10］o吕俊华等用纸片法抑菌试验证明，100%蒲公英浸出液滤纸片对金

4、黄色葡萄球菌、变形杆菌甲型链球菌和乙型链球菌均有明显抑菌作用，体外抑菌作用明显［ll］o童延清等研究了蒲公英对表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、粪肠球菌、人肠埃希菌和变形杆菌的抑制作用［12］。宋学宏等研究表明蒲公英对强毒株嗜水气单胞菌和温和气单胞菌有一定抑制作用［13］。蒲公英提取物对番茄花叶病也有抑制作用［14］o2蒲公英体外抑菌研究常用方法2.1药敏纸片法在普通营养琼脂培养基基础上高压消毒后，冷却至56°C时加上5%〜10%无菌脱纤维绵羊血混匀，倒入培养皿中备用。将细菌用取菌环分别致密接种到血平板培养基上后，以无菌操作将含蒲公英浸岀液的直径0

5、.4cm的滤纸片贴到培养基上后，37°C培养24h观察测量抑菌环直径。此方法是蒲公英抑菌实验中最常用的方法［15］o2.2固体稀释法［16］该方法取不同浓度的蒲公英浸膏稀释液lmL,分别与15mL的热营养琼脂于平皿中混合均匀。凝固后，从各待测菌液中分别取岀50&mu儿的菌悬液，均匀涂抹在平皿培养基表面，制成含菌的平板，在相应的温度下培养，观察菌落生长情况并记数。2.3管碟法［17］将200-1000&mu儿的Tip头从尾部约lcm处剪下，剪成中空的小管，灭菌后用无菌的银子将小管插在含菌的培养基上，每个平皿分散地插相应个数的小管，加入已灭菌的蒲

6、公英浸膏稀释液，放入培养箱培养，观察抑菌圈直径即可。2.4琼脂打孔法［18］用200-1000&mu儿的Tip头（尾部直径约lcm）的尾部在培养基上对称地打两个孔，在每个孔中加入150&mu儿的蒲公英汁,然后在平板中央加入20μL的已活化的菌悬液。培养观察菌种的生长情况，若蒲公英浸膏稀释液完全渗入培养基或有所蒸发，要及时向每个孔中补充相同体积的蒲公英浸膏稀释液。2.5二倍稀释法。在第一支无菌试管中放入2倍浓度的液体LB培养基lml,在其余10支试管中放入液体LB培养基1ml,并取显齿蛇葡萄提取物lml加入第一支试管中，混合后从中取lml

7、加入第二支试管的LB培养基中，再取lml加入第三支试管中，依次进行二倍稀释，最后一支试管中取lml弃去，使每支试管都含有lml的不同稀释度药液。在上述含不同稀释度的蒲公英提取物试管中各接种0.1ml适当浓度的试验菌，置35°C恒温箱中培养24h,观察生长情况，3两种培养基对蒲公英体外抑菌效果影响对蒲公英全草水提液与醇提液分别在普通营养培养基和M2H琼脂培养基上进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑菌作用的观察，比较两种培养基对中药体外抑菌效，结果表明，M2H琼脂培养基对其抑菌作用的检测效果比普通营养培养基灵敏［19］o4蒲公英抑菌物质的提取工艺在以

8、大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的抑菌实验跟踪下，通过单因素实验和正交实验得岀，以大肠杆菌和沙门氏菌为供试菌的情况下［20］,蒲公英最佳提取工艺条件为。以湖北产蒲公英为原