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《无血清细胞培养基的主要补充因子及研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、海峡药学2006年第18卷第4期量的影响〔J〕.安徽中医学院学报,1994,13(4):59～6011首都医科大学学报、1996,17(1):28～311〔29〕ChenJC,NiuXM,LiZR,etal1FourNewCucurbitaneGlycosides〔31〕MurphyKJ,ChronopoulosAK,SinghI,etal1DietaryflavanolsandfromHemsleyajinfushanensis〔J〕1PlantaMed,2005;71(10):983procyanidinoligome
2、rsfromCocoa(Theobromacacao)inhibitplatelet～9861function〔J〕1AmJClinNutr,2003,77(6):1466～14731〔30〕赵淑芬,张建华,韩桂秋1山醇提取物的抗血小板聚集作用〔J〕无血清细胞培养基的主要补充因子及研究进展陈锋(厦门伯赛基因转录技术有限公司厦门361003)摘要:无血清培养基是在合成培养基的基础上,引入成分完全确知或部分明确的血清替代成分,使培养基既满足细胞培养要求,又有效避免因使用血清而带来的问题,已被广泛应用于研究和生产中,特别是细胞工
3、程生物制药中。本文概要的介绍了无血清培养基的发展历程和应用,无血清培养基的组成和主要的补充因子及其各自的作用,以及新近研究进展。关键词:无血清培养基;补充因子;CHO细胞;研究进展中图分类号:R92712文献标识码:A文章编号:100623765(2006)0420010204动物细胞的体外培养是近些年来发展相当迅速的一门112无血清培养基的应用由于无血清培养基可完全采用现代生物技术。而大多数的动物细胞在进行体外培养时仍需已知分子结构或构型组分的低蛋白,甚至完全不采用蛋白组采用含血清的培养基,血清的主要作用在于向细胞提供生
4、长分,因此被广泛应用于细胞工程领域。在细胞工程中用于生产增殖所需的激素、生长因子和其他营养物质,但每个批次的血疫苗、单克隆抗体和生物活性蛋白等生物制品是无血清培养清之间存在批间差异,且血清价格昂贵,容易被病毒和支原体基最重要同时也是最有发展前途的应用。这是因为一方面无感染,此外血清中大量成分复杂的蛋白质给疫苗、细胞因子和血清培养基的成分相对明确、质量一致且蛋白质含量低,因而单克隆抗体等细胞产品的分离纯化带来很大的困难。基于这有利于提高细胞产品生产的稳定性并使细胞产品易于纯化;些不利因素,自上世纪50年代起,细胞生物学家们开
5、始研究更为重要的一方面是可以通过对无血清培养基成分的优化,血清中各成分在细胞培养中的作用,以期寻找合适的补充因使不同的细胞能各自在最有利于其生长或最有利于表达目的子替代血清。产物的环境中持续高密度培养。在含血清的合成培养基中,往71976年,Sato在英国《自然》杂志上公布他的一项实验结往不能较长时间的维持细胞高密度培养(>10cellsömL),而果,他和同事在垂体细胞株GH3的培养中没有使用血清,而需定期减少细胞的培养密度。同时衰老死亡的细胞可把细胞是在培养基中添加了三碘甲状腺素(T3)、促甲状腺激素释放内的蛋白酶释放
6、到培养基中,导致蛋白类目的产物的降解。这激素(TRH),甲状旁腺激素(PTH)、生长调节素(So2对蛋白类生物制品的生产是极为不利的。而无血清培养基可matomedin)和转铁蛋白(Tf),GH3细胞株在无血清介质中能通过延长细胞的G1期或迫使细胞处于G0期而较长时间的维够维持生长。此后无血清细胞培养技术迅速发展,至今已有多持细胞高密度培养,从而尽可能的生产目的产物。表2列出了个细胞株能在无血清培养基中成功生长和增殖。部分已用无血清培养基进行生产的生物制品1无血清培养基的发展过程和应用表2部分已用无血清培养基进行生产的生物
7、制品111纵观无血清培养基的整个发展历程,可将其大致分为三生物制品细胞系培养方式EPOCHO贴壁培养代,第四代无血清培养基的研究开发并投入市场将成为发展HBsAgCHO贴壁培养趋势IFN-BCHO贴壁培养表1无血清培养基的简要发展历程MAb骨髓瘤悬浮培养tPA骨髓瘤悬浮培养成分优缺点IFN-CCHO悬浮培养不含有血清,但含有蛋白含量高(低于含血清培养hGHCHO贴壁培养第一代大量的动物或植物基),不利于目标蛋白的分离纯M-CSFTCR-29SF贴壁培养蛋白化B-GALSf-9悬浮培养完全不采用动物来第二代降低生产成本,加快
8、报批速度源蛋白除了用于生产生物制品外,无血清培养基还被广泛的应完全没有蛋白或含成分确知,细胞培养和生产容易用于细胞生物学、药理学、肿瘤学领域:1.研究细胞的分化条第三代做到恒定,分离纯化容易,成本量极低低。但仅限于几个特定的细胞株件:在传统的细胞培养中,细胞往往表现为分化停止或某些特第四代无血清,无蛋白
