《免疫血液检测》ppt课件

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1、红细胞血型检测新乡医学院三全学院主要内容输血前免疫血液学检查盐水介质试验技术酶处理试验技术抗球蛋白试验技术聚凝胺介质试验技术微柱凝集试验技术吸收放散试验凝集抑制试验教学目标掌握输血前免疫血液学检查内容掌握盐水介质、抗球蛋白试验、聚凝胺介质和微柱凝集试验检测方法试验原理、结果判读及注意事项熟悉吸收放散、凝集抑制试验了解酶处理试验和红细胞血型分子生物学检测技术第一节输血前免疫血液学检查一、受血者标本处理二、受血者和供血者ABO和Rh定型三、不规则抗体的筛选和鉴定四、交叉配血试验五、实验结果的规范化报告一、受血者标本处理（一）标本的采集（二）标本的接受核对、询问输血史、妊

2、娠史等、注明最后一次输血日期（三）标本的要求准确无误来自受血者和供血者防止受血者血液标本稀释和（或）溶血受血者标本须输血前3天采集；再次输注时间隔24h，重新采集标本输血后，受血者和供血者标本保存2~8℃至少7天1ABO正反定型及常见问题（一）4RhD定型及常见问题（二）4243二、受血者和供血者ABO和Rh定型ABO血型鉴定原理正向定型：已知的特异性抗体（标准血清）检查红细胞的未知抗原反向定型：已知的血型的标准红细胞检查血清中的未知抗体A抗原B抗原A和B抗原无A和B抗原抗A抗体抗B抗体抗A、抗B抗体无抗A、抗B抗体ABO血型鉴定结果判断正向定型（标准血清+被检者红

3、细胞）反向定型（标准红细胞+被检者血清）结果判断抗A抗BA型红细胞B型红细胞O型红细胞+--+-A-++--B++---AB--++-OABO正反定型不符分析基本程序首先重复试验重新采集献血者与受血者血液标本查询受血者既往病史及输血史和用药史等多次洗涤标本红细胞应用抗-AB、抗-A1、抗-H检测红细胞分析O型筛选细胞检测结果输血治疗的首要步骤组织器官移植新生儿溶血病ABO正反定型的临床意义复检正定型血型结果的准确性，纠正漏检、误报亚型能够纠正因疾病原因造成的红细胞抗原减弱造成的血型错误排除获得性抗原（如类B抗原）和冷凝集现象对红细胞定型的干扰不规则抗体ABO反定型的

4、临床意义错加试剂或标本技术和操作受血者红细胞或血清ABO正反定型不一致的原因试剂失效或污染细胞与血清间比例不适当溶血现象未能识别漏加试剂结果记录或判断错误血清异常红细胞致敏近期输血疾病导致抗原减弱抗体减弱不规则抗体年龄近期进行大量血浆置换治疗RhD定型及其常见问题1.Rh定型RhD定型，试管法最经典，多使用微柱凝胶卡2.RhD阴性确认IgM抗-D阴性三个厂家IgG抗-D进行确认抗人球蛋白法进行确认三种IgG抗-D试剂均为阴性，报RhD阴性一种或一种以上IgG抗-D试剂为阳性，报弱D三、不规则抗体的筛查与鉴定概念（一）考察心得2不规则抗体鉴定（三）筛查方法（二）影响因

5、素（四）遇到的问题五不规则抗体的筛选和鉴定患者血清+试剂筛选红细胞盐水介质聚凝胺介质（最为常用）抗人球蛋白介质（最为常用敏感）酶介质法要求和内容结果解释及处理方案影响因素四、交叉配血试验交叉配血的主次侧接收申请单和血标本核对无误（如有错误与医生/护士联系）进行交叉配血相合结果输入微机不相合打印发血单血液中心交叉配血工作流程五、试验结果的规范化报告血库收到输血申请单后，进行交叉配血试验申请单：申请日期、需要血液的日期和时间、患者姓名、出生日期、性别、住院号、病房号等信息齐全，并申请人签字发血单：受血者姓名、性别、病案号、ABO及Rh血型、供血者编号及血型、交叉配血实验

6、结果、发出血液品种及血量、发血日期及时间、配血者、发血者和取血者姓名双方核对申请单、血液标签和血液外观等发血程序（常规和紧急情况）1.常规情况下发血的一般程序(1)临床申请(2)血液新鲜程度的选择(大量用血和新生儿)(3)血型的选择(ABO、Rh、新生儿换血、不规则抗体筛检)(4)交叉配血(5)发血，做好记录发血程序（常规和紧急情况）2.紧急情况下发血的一般程序(1)快速检血型，选ABO、Rh同型血(2)标记“未经配血”字样(3)留供受者血样(4)发血后做好记录(5)与临床保持联系第二节盐水介质试验技术本质凝集反应，直接凝集试验检测IgM类抗体基本方法：平板法、试管

7、法、微孔板法结果判读阳性：凝集或溶血阴性：红细胞呈游离混悬状态第二节盐水介质试验技术瓷板法试管法微孔板法试管法结果判定红细胞凝集强度判断标准第三节酶处理试验技术试验原理酶试验技术的分类结果判读影响因素第四节抗球蛋白试验技术抗人球蛋白试验：又称Coombs试验，是诊断自身免疫性溶血性贫血的重要依据。主要用于检测IgG、IgA等抗体参与的抗原-抗体反应，也可测定补体组分C3、C4片段参与的免疫反应分类：直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验抗球蛋白试验原理Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。直接试验：是检查被检红细