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1、树舌灵芝深层发酵培养基的优化研究摘要：通过单因素试验，确走树舌灵芝的适宜氮源为豆饼粉，适宜碳源为米糠和蔗糖；在此基础上，以筛选的碳源、氮源和无机盐KH2PO4和MgSO4-7H2O为考察因素，以总三禧产量为主要指标利用正交试验优化培养基配方比例，确定树舌灵芝液体发酵培养基最佳配方为：米糠4%、蔗糖1%、豆饼粉4%、KH2PO40.2%>MgSO4-7H2O0.05%0关键词：树舌灵芝；深层发酵；正交设计；培养基优化；总三菇产量OptimizationoftheSubmergedFermentationMediumofGano
2、dermaapplanatumAbstract:InordertofindtheoptimumculturingmediumofGanodermaapplanatum,singlefactortestinculturingutensilwascarriedout.Theresultshowedthatricebranandsucrosecouldbeusedasthemixedcarbonsources,andsoybeanpowderasthenitrogensources.Then,intheorthogonaltest
3、,C-sourccs,N-sourccsandinorganicsaltsKH2PO4andMgSO4-7H2Owereconsideredasinfluencingfactors,andthetotaltriterpenecontentasthemajorperformanceindicators.Theoptimummediumcomponentswereasfollows:ricebran4%,sucrose1%,soybeanpowder4%,KH2PO40.2%,MgSO4-7H2O0.05%.Keywords:G
4、anodermaapplanatum;submergedfermentation;orthogonaltest;mediumoptimization;totaltriterpenecontent树舌灵芝(Ganodermaapplanatum)又称树舌扁灵芝，屈于真菌门(Eumycota)、担子菌亚I'J(Basidiomycotina)、层菌纲(Hymenomycetes)、非菌褶目(Aphyllophorales)、灵芝菌科(Ganodermataceae)>灵芝屈(Ganoderma)⑴。树舌具冇广泛的药理活性f2_1
5、2b民间用其治疗食道癌、肺结核，临床用于治疗腹水癌、神经系统疾病、肝炎、心脏病、糖尿病和糖尿病并发症，预防和治疗胃溃疡、急慢性胃炎、十二指肠溃疡、胃酸过多等胃病。另外研究表明，树舌三砧类物质具冇血压双向调节、抗肿瘤、抗病毒等药理活性2X4］。口前国内对树舌灵芝的化学成分和药理学研究得比较多，但对树舌灵芝深层发酵方而的研究较少〔5。深层发酵培养树舌菌丝休具有发酵周期短、工艺简单、易控制、适于工业化大生产等优点卩％本试验应用高氯酸一一香草醛显色法冈来测定树舌灵芝发酵菌丝总三诂类化合物含量，以总三诂产量为基准，筛选出树舌灵芝深层发
6、酵的最适培养基。1.材料和仪器1.1供试菌株树舌灵芝了实体采口于江苏省常熟地区。1.2实验材料硝酸鞍、硫酸鞍、氯化鞍、硝酸钾、蛋H月东、酵母膏、葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、高氯酸、冰酷酸、香草醛均为分析纯；齐墩果酸对照品，中国药品生物制品检定所；豆饼粉、玉米粉、麦芽粉、甘薯粉、米糠和缺皮均为提取液，煮沸0.5h后用纱布过滤制得。1.3主要仪器DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱，上海精密实验设备冇限公司；YXQ-LS-STT全自动立式电热压力蒸汽灭菌锅，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；FA1104型电子天
7、平，上海良平仪器仪表有限公司；JII755B紫外分光光度计，上海菁华科技有限公司；IIII-4数显恒温水浴锅，金坛市富华仪器冇限公司；KQ3200E型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；HYGII摇床，上海欣蕊自动化设备有限公司；SZX-1D超净工作台，苏净集团安泰公司。2.实验方法2.1基本培养基2.1.1斜面培养基PDA培养基为土豆20%,葡萄糖2%,琼脂2%,pH自然。接一块绿豆粒菌块接种于PDA培养基的中央，25°C恒温培养7天。2.1.2液体培养基玉米粉1%,蔗糖2%,蛋白腺0.5%,KH2PO40.1%,MgS
8、O4-7H2O0.05%,pH自然。2.1.3氮源筛选培养基葡萄糖2%,可溶性淀粉1%,KH2PO40」％,MgSO4-7H2O0.05%,PH自然。分别以豆饼粉、获皮、蛋门月东、酵母膏、硫酸鞍、硝酸鞍、氯化鞍、硝酸钾为氮源，添加量为2%。2.1.4碳源筛选培养基鉄皮2%,KH2PO4O」
