三七NAC转录因子基因PnNAC1的克隆及表达特性分析

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1、三七NAC转录因子基因PnNACl的克隆及表达特性分析王国东李金晶白智伟关瑞攀杨野曲媛崔秀明刘迪秋昆明理工大学生命科学与技术学院摘要：为了揭示三七抗病防卫反应的调控机制，对三七的一个NAC转录因子的全长cDNA进行了克隆和表达特性分析。以一年生三七幼苗为材料，根据编码NAC转录因子的三七转录组Unigene设计引物，采用快速扩增cDNA末端技术，克隆得到一个新的NAC转录因子基因，命名为PnNAClo序列分析表明，该基因全长815bp,含有24bp的5'非翻译区和215bp的3'非翻译区，以及576bp开放阅读框，共编码191个氨基酸，具有保守的NAC结构域。实时荧光定量PC

2、R结果显示茉莉酸甲酯预处理三七根部大幅提高了PnNACl在根中的转录水平，接种茄腐镰刀菌后，PnNACl的表达进一步上升，在接种后4h转录水平达最大值;无菌水预处理的三七屮，PnNACl也快速响应茄腐镰刀菌的侵染，但表达水平明显低于茉莉酸甲酯预处理的样品。接种人参链格抱后PnNACl在叶片的表达量受抑制。茉莉酸甲酯、乙烯利、水杨酸和过氧化氢4种信号分子处理三七根部均诱导PnNACl的表达。表明PnNACl响应几种逆境相关信号分子，并参与三七对茄腐镰刀菌和人参链格鞄的防卫反应。关键词:三七;NAC转录因子;茄腐镰刀菌;人参链格抱;防卫反应;作者简介：王国东（1993-）,男，云

3、南普洱人，主要从事生物工程研究。作者简介：刘迪秋（1979-），女，湖北建始人，教授，博士，主要从事植物抗病基因工程研究。收稿日期：2017-07-06基金：国家自然科学基金项目（81560610）CloningandExpressionAnalysisofaNACTranscriptionFactorGenePnNAC1fromPanaxnotoginsengWANGGuodongLIJinjingBAIZhiweiGUANRuipanYANGYeQUYuanCUIXiumingLIUDiqiuFacultyofLifeScienceandTechnology,Kunmin

4、gUniversityofScienceandTechnology;Abstract：TorevealtheregulatorymechanismofdefenseresponseinPanaxnotoginseng(Burk)FHChenagainstdiseases,aNACtranscriptionfactorgenewasclonedfromP・notoginseng,anditsexpressionpatternwasanalyzedinthepresentstudy.OneyearoldP.notoginsengseed!ingswereusedasmateria

5、ls.AccordingtoanUnigenefromP.notoginsengtranscriptomcwhichencodedaNACtranscriptionfactor,thegene-specificprimersweredesigned.UsingtherapidamplificationofcDNAendtechnology,anewNACtranscriptionfactorgeneofP・notoginsengwasobtainedwhichwasnamedPnNAC1.ThecDNAsequeneeofPnNAC1was815bpinlengthandco

6、ntainedanintactopenreadingfreime(ORF)of576bp,a24bp5"-untranslatedregion(UTR),anda215bp3'-UTR.TheORFofPnNAC1encodedaputativeproteinwith191aminoacidresidueswhichhadaconservedNACdomain.Real-timePCRresultsindicatedthatpre-treatmentwithmethyljasmonatetorootsofP.notoginsengseed!ingsincreasedthetr

7、anscriptionlevelofPnNAC1inroots,thenthetranscriptionlevelofPnNAC1wasfurtherrisenafterinoculationwithFusariumsolani,anditsexpressionlevelwasmaximalat4hpostinoculationwithF.solani.Forthecontrol(pretreatmentwithsterilewater),PnNAC1alsorapidlyrespondedtoinfe