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1、百合快速繁殖研究进展陈静，陈玲，陈秋燕，陈伟强，陈燕云(龙岩学院生命科学学院，09生物技术第一组)摘要:百合是一种极具观赏和药理价值的重要野生花卉。根据该植物的繁殖特点，综述了国内外对百合组织培养快速繁殖的研究进展，并对其进一步的研究进行了展望。关键词：百合快速繁殖综述百合(Lilium.spp)是当前著名的观赏花卉Z—，也是应用最广泛的切花Z—。我国是世界百合种质资源的分布中心，约有47个种、18个变种，占世界百合属总数的一半以上。其中36个种、15个变种是我国特有的珍稀种类。百合除具有观赏价值外，大多
2、数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。中药百合中含有皂昔、生物碱、多糖、磷脂、蛋白质、氨基酸、维生素、淀粉和大量微量元素等化学成分［1］。屮医认为,百合性味甘寒，具有养阴润肺、清心安神Z功效,用于治疗阴虚久咳、痰屮带血、虚烦惊悸、失眠多梦和精神恍惚等症［2］。现代医学认为，百合多糖具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、增强机体免疫力、提高淋巴细胞转化率的特性［3］。百合既可入药又可作为保健食品，为药食共用之品。但由于人类、非人类的影响，使一些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到严重威胁。传统的百合繁殖方
3、法主要采用常规分球、分珠芽鳞片抒插、鳞片包埋等。但采用这些方法繁殖，繁殖系数较小,特别是经多代分殖以后，常造成种性退化,甚至病毒积累，影响百合的产量和质量。利用组织培养技术，能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度，缩短了百合的生育周期。在百合杂交育种中也存在着基因库贫乏、种间杂交不亲和等局限性，而组织培养中的胚培养、花药培养等技术则可克服这些弊端。因此，利用组织培养百合是一种很有前途的方法。1一般繁殖过程1」无菌材料的建立取百合鳞茎流水冲洗1〜3h,取出加入10%的84消毒液浸泡20min,
4、取111后加入0•1%升汞浸泡10min,最后用重蒸馆水冲洗5次。1.2.2脱毒苗的获得及百合的病毒检测用上述消毒后的材料在无菌的条件下在显微镜下找出大小为()・2〜0・3mm的茎尖分生组织，并把剥离的茎尖分生组织接种到MS+BA1<0+KT0・5+NAA0・1培养基上，诱导岀再生植株。培养条件:培养温度为(25±1)°C,光照强度为1500〜2000lx,光照时间为10-16ho1.2.3病毒检测1.2.3.1材料试管苗时期的百合脱病毒苗和对照苗的叶片。1.2.3.2方法茎尖分化成苗，长至5〜6cm高,
5、采集叶片进行病毒检测⑷。供试叶片低温(-18°C)下解冻;1・5倍体积0・1mol/LPBS(含2・5%戊二醇,10%氯仿,pH=7・4)匀浆2min,过滤;滤液加入10%正丁醇，匀浆1〜2min,4°C下10000r/min离心20min;上清液加入6%PEG6000和0-1mol/LNaCl充分溶解,10000r/min离心20min;沉淀用0*2mol/LPBS悬浮至40〜6OmL;2%磷钩酸(pH=6・8)负染色2min,电镜(H1TACH-7000)下观察，每个样品做3个铜网，每个铜网至少取20
6、个不同视野检测病毒，并以未脱毒的样品作为对照，以确定脱病毒的效果。通过在电镜下反复观察检测,确定有10个样品脱病毒彻底，将作为今后提供无病毒优质种苗的原种苗。1.3百合快繁体系的建立1.3.1无菌材料的建立取百合鳞茎,流水冲洗1〜3h,取出加入10%的84消毒液浸泡20min,取出后加入0・1%升汞浸泡10min,最后用重蒸懈水冲洗5次。接种到培养基上。1.3.2丛生芽诱导培养基筛选采用MS培养基，考虑BA(0・5,1・0,1・5,2・0mg/L4种浓度)、IAA(0•2mg/L)>PP333(1・0,2
7、・0,4・0,6・0mg/L4种浓度)、KT(1•0mg/L)四种激素，每批试验处理10瓶，每瓶接种4棵，记录芽数包括顶芽腋芽,30〜35d观察结果并记录。1.3.3生根诱导培养基筛选取髙约1・5cm带有2个节的无菌苗接种于添加ABT(生根粉),BA,NAA(a-蔡乙酸)3种不同生长素浓度的1/2MS培养基上，培养25d,记录生根率、根长、平均根数及根粗细情况。2外植体的研究目前，百合植株的不同部位均可采用组织培养的方法繁育出新个体并进行快速繁殖。如,鳞片、根尖、叶片、子房、种子、花梗、花瓣、花柱、花丝、
8、花药、胚、腋牙、牙尖、珠牙等。据不完全统计，国内外已培养成功用于观赏的百合种和品种有100多种［5］。最早Dobreaux等首次用纯百合(L.Candidum)的花蕾成功诱导出小鳞茎。程治英等对30多种或品种的百合进行组培，结果证实：不同品种、不同部位、不同产地的分化能力不同；由花柱或花梗培养的小苗，虽然其鳞茎不大，但从移栽到开花的时间大大缩短，如麝香百合杂种系花柱培养的试管苗从移栽到开花的时间只需半年多的时间［6］。Nhut
