长蛸不同群体ISSR分析【开题报告】

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1、毕业论文开题报告生物科学长蛸不同群体ISSR分析一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义简单序列重复(Inter-simplesequencerepert)，简称ISSR。ISSR是一种基于微卫星序列发展起来的新的分子标记技术，是在SSR基础上发展起来的一项新的标记技术。于SSR标记相比，ISSR引物可以在不同的物种间通用，不像SSR标记一样具有较强的特异性；于PAPD和RFLP相比，ISSR揭示的多态性较高，可获得几倍于RAPD的信息量，精确度几乎可于RFLP想媲美，检测非常方便，因而是一种非常有发展前途

2、的分子标记。ISSR分子标记在动物上常应用于以下几个方面：1.群体遗传结构及遗传多样性分析。使用ISSR引物对不同基因组体外扩增时,扩增产物表现出多态性。2.DNA指纹库的建立。ISSR标记快速、简便、可靠、多态性高、重复性好,是一种较好的指纹库构建方法,对品种鉴定和亲缘关系的分析具有重要作用。3.分子标记遗传图谱的建立和基因定位。由于ISSR可以揭示高度多态性，又遍布于染色体上，可以填补连锁图上较大间隙，是更易为育种家们接受的经济、实用的分子标记。4.动物分子标记辅助选择育种。标记辅助选择(MAS)就是用DNA水平

3、的选择来代替以表型为基础的选择。由于它不受环境、性别、生长发育的限制，可进行早期选种，从而缩短世代间隔，提高选择强度、选种效率和准确度。长蛸(Octopusvariabilis)，隶属于软体动物门，头足纲，八腕目，蛸科(Octopodidae)，俗称长八带鱼（短蛸俗称八带鱼）、鲅须。在我国南北各海区均有广泛分布，其中北部海区略多。长蛸为沿岸底栖头足类，是肉食性动物，主要以小型蟹类、贝类为食，长蛸个体大、肉质肥厚鲜美、营养丰富，富含蛋白质和氨基酸，可食用部分占总体的90％以上。肉除鲜食外，还可以加工成干制品，食用方式多

4、种多样。其内骨骼(中药名海螵蛸)和墨囊具有较高的药用价值，有止血、抗癌等功效，因而长蛸具有较高的经济价值。近几年，随着大量出口日本、韩国，市场供不应求现象严重，经济价值不断攀升，已成为北方重要经济头足类。同时，黄渤海捕捞力度加大造成了自然资源严重衰退。国内关于长蛸形态、生态分布、组织学与组织化学的研究已见报道，关于种质资源遗传多样性方面的研究很少报道，而生物群体的遗传多样性是评价生物资源状况的一个重要依据，是物种适应多变的环境条件、维持长期生存和进化的遗传基础，对种群内和种群间遗传多样性的认识在进行种质鉴定和亲本选择

5、时具有重要的现实意义，对长蛸进行遗传多样性的研究具有重要的意义。一、研究的基本内容，拟解决的主要问题。用ISSR技术研究野生长蛸群体的遗传多样性，并对其进行品种鉴定和亲缘关系分析。二、研究步骤、方法及措施：1.DNA提取：一般采用常规的提取DNA的方法，即SDS法，对DNA样品质量和浓度进行测定。2.筛选引物3.ISSR-PCR：为保证ISSR-PCR反应结果的清晰、准确，对扩增反应的主要因素有模板浓度、Mg2+浓度、退火温度等进行优化4.电泳，染色及观察拍照。5.数据分析四、参考文献[1]李海生，ISSR分子标记技

6、术及其在植物遗传多样性分析中的应用[J].生物学通报，2004,39（2）；19-20.[2]王伟继，孔杰。ISSR-PCR技术在对虾中的应用初步研究[J].海洋水产研究，2002,23（1）；1-4.[3]郑芳，吕秀玲，孙红英等.ISSR标记在河蟹种质检测中的应用[J].中国水产科学，2007,14（1）；45-51.[4]沈玉帮，李家乐，牟月军。厚壳贻贝于贻贝遗传渐渗的分子生物学鉴定[J].海洋渔业，2006,28（3）；195-200.[5]李文红，姚建亭，王继成等。龙须菜(Gracilarialemaneif

7、ormis)选育品系及其野生型的ISSR指纹分析[J].海洋与湖沼，2005,36（3）；241-247。[6]SunX，ZhangXC，MaoYX，etal.IdentificationofPhaseandsex-relatedISSRmarkersofRedAlgeGracilarialemaneiformis[J].JournalofOceanUniversityofChina,2006,5(1);82-84.[7]谢潮添，纪德华，陈昌生，等.ISSR标记在坛紫菜不同色泽丝状体种质鉴定中的应用[J].水产学报，

8、2007,31(1)；105-111.[8]崔灵英，许璞，朱建一，等.4中紫菜叶状体的ISSR分子标记分析[J].中国水产科学，2006,13（3）；371-377.[9]HallMM，VisML.Phylogeographyandwithin-streamgeneticvariationofBatrachospermumhelmentosum