DB1303∕T 188-2005 牛冷冻胚胎移植技术规程

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1、B43inlop秦皇岛市地方标准DB1303/T188-2005牛冷冻胚胎移植技术规程2005-10-31发布2005-10-31实施秦皇岛市质量技术监督局发布DB1303汀188-2005月Ij吕木标准由秦皇岛市畜牧局提出；本标准在秦皇岛市畜牧局归口；本标准起草单位：秦皇岛市畜牧＿丨：作站。本标准起草人：郑庆丰、郭瑞芬、鲍淑琴、孙红梅。DB1303门'188-2005牛冷冻胚胎移植技术规程范围本规程规定了牛冷冻胚胎移植的受体牛的选择及饲养管理、受体牛的同期化发情处理、受休牛的发情鉴定、受体牛的胚胎移植、妊娠受体牛的饲养管理

2、。本规程适丿I]一于秦皇岛市规模养牛场户的高产优质冷冻胚胎的移植。2受体牛的选择及饲养管理2.1受体牛的选择2.1.1选择时间选择时间宜确定在实施胚胎移植以前2个月左右（即2个发情周期），以便于观察受体牛的发情周期。2.1.2品种受体牛的品种应以体型人小与供体牛相符的黄牛及其改良品种为宜。2.1.3年龄一般要求受体牛年龄在3岁一6岁之间。2.1.4体躯结构体型外貌良好、丰满；长、宽、深发育充分；身体前、中、后躯，胸深、四)l比例协调；具有良好的乳房；被毛要有光泽。2.1.5体况选择发育中等以上水平的个体，有较明显的品种特征，

3、肢势端i上，年龄与体重相吻合，膘情在7成以上，体格健壮、健康无病，具有很好的耐病力。2.1.6繁殖性能应充分了解该牛的繁殖性能及是否患有繁殖机能疾病。选择经产牛时‘，应选择分娩在90大以上，产犊性能和哺乳能力良好，无流产史的牛，同时应了解其发情周期是否正常、已产胎次、上一胎产犊时间及数量、Ll前是否受孕等情况，对：1飞繁殖性能差、有繁殖机能疾病、二次人＿匕受精不受胎或已受孕的牛坚决不能选）月。2.2受体牛的饲养管理2.2.1受体牛的饲养受体牛在移植前6周一8周开始补饲，根据首体牛的膘情日喂精料1.5kg左右，保持日增重(0.

4、3-0.4)kg／日。在日粮组成中若不添加苜蓿，则豆饼等蛋白饲料应r片20-25%,添加首ru至粗饲料喂量的40%时，豆饼给量可降到18-20%。玉米占45％左右，麸皮20%左右为宜。钙磷比例要合适，如添加磷酸氢钙可「片精料I-1.5%。食盐添加量0.5-1%，同时保证微量元素及维生素足量供给。2.2.2受体牛的管理受体牛单独911群饲养，保持环境相对稳定，避免应激反应。3受体牛的同期化发情处理3.1同期化处理之前的准备对受体牛进行直肠触摸，检查卵巢是否处于活动状态。处于活动状态的牛方可进行同期化发情处理。3.2同期化发情处

5、理用药品及剂量DB1303/T188-2003药fill:氯前列烯醇(I'G,0.2mg/2耐／支）；刘量；经产2卜(0.3^-0.4)mg／次，育成牛(0.2-0.3)Big／次。缺乏VA.H.H.I：的季节，在注射PG时‘同时注射VA.II.U.1针剂10m.1/头，但两种药u：不能在同一位置注射。3.3同期化发情处理的方法采川三次注射法〔肌注）：第一次注射，在任意一大：第一次注射，在第一次注射后11大。第二次注射后24小时一％小时观察发情。第一次注射观察发情24小1丨．J）沂，对发情受体牛注射促排3号12.5ug/头移

6、植效果更佳。受体牛发情之日计为0大，6大一8天内进行）J-1)抬移植。4受体牛的发情鉴定应对受体牛跟群观察，以受体牛稳定站立接受其他丿柳爬跨为发情标准。丿卜准确记录开始站立接受爬跨的时间（以小时为单位记录）5受体牛的胚胎移植5.1牛胚胎移植的适宜季节舍饲型牛避开最冷最热的季节，可在其他任何季节进行移植。一般以每年4月一月和9月一10月比较理想。5．2受体移植所需器械、药品移植枪、塑料硬外套、近无菌软外套、碘酊棉球、剪毛剪,2%利多卜因,70%酒精棉球、5m1一次性注射器、卫生纸5.3受体牛移植操作步骤5.3.1受体牛在发情后

7、6大一8大之间均可进行移植（发情之时定为0小时）。移植前对受体牛进行直肠触摸，检查黄体是否合格。合格者）丨11：移植。5.3.2受体牛实行1-2尾椎间硬膜外麻醉，擦拭州jI5.3.3对照冷冻胚胎细管外记录和合格受体的发情记录，合理的搭配受体牛和胚胎。5.3.4角军冻胚胎5.3.4.1胚胎解冻所需的仪器、器材。立体显微镜,//i度计、解冻）月水杯,0.25ml塑料细管、吸卵管、细管打11本卜、装管器、0100mm塑料培养皿、0.22um钅｝¡¤头式细菌滤器。5.3.4.2胚胎解冻所需溶液。保存液：含0.IM牛血清自蛋白的PBS

8、液；解冻液：1.M蔗糖／保存液。5.3.4.3胚胎解冻方法。10%一甘油／保存液冷冻胚胎的解冻：胚胎～空气浴（18℃一25¡ãC)10秒～32℃水浴10秒，揩二{二细管一剪去细管塞一推出胚胎一解冻液4分钟一保存液，冲洗5次一6次一镜检一装管一细管装入移植枪～移植（胚胎解冻后30分一45分钟