入侵果实蝇检疫鉴定方法

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1、ICS备案号:SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/Txxxx——xxxx伪短体线虫检疫鉴定方法DetectionandIdentificationofPratylenchusfallaxSeinhorst,1968(报批稿)XXXX・XX・XX发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、111国检验检疫科学研究院、小华人民共和国重庆出入境检验检疫局。本标准

2、主要起草人:杜宇、陈云勇、王宏毅、李旻、和万忠、葛建军、孔徳英、王龙文、查涛、曹云华。伪短体线虫检疫鉴定方法1范围本标准规定了伪短体线虫的分离方法、永久玻片标木制作、形态学鉴定和样品保存等方法。木标准适用于花卉、观赏植物、蔬菜、果树等多种植物根部和土壤及栽培介质屮伪短体线虫的检验鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注FI期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注口期的引用文件,其最新版本(包括所冇的修改单)适用于木文件。GB/T24828穿刺根腐线虫检疫鉴定方法;GB/TGB/T28061鳞球茎花卉检疫规程;S

3、N/T1157进出境植物苗木检疫规程;SN/T1158进出境植物盆景检疫规程;SN/T2122进出境植物及梢物产品检疫抽样。3伪短体线虫的基本信息学名:PratylenchusfallaxSeinhorst,1968异名:无英方名:falserootlesionnematode分类地位:线虫门Nematoda>侧尾腺纲Secementea、垫刃亚纲Tylenchia>垫刃目Tylenchida、垫刃亚目Tylenchina、纽带总科Hoplolaimoidea、短体线虫科Pratylenchidae、短体线虫亚科Pratylenchinae、短体属

4、丹力tylenchus。传播途径:寄主植物根、感虫土壤、介质土是远距离传播的主要途径。短体线虫属全世界有效种共有70多种,伪短体线虫近似种有穿刺短体线虫尺penetrans(Cobb,1917)Fi1ipjev&SchuurmansStekhoven,1941和铃兰短体线虫尺convallariaeSeinhorst,1959O伪短体线虫的具它信息参见附录Ao4方法原理在现场采集伪短体线虫有可疑为害症状的寄主根及根围土,无症状时,按照GB/T28061、SN/T1157、SN/T1158和SN/T2122中现场检疫规定的内容进行样品采集,按照GB/

5、T24828实验室检测规定的内容进行线虫分离,制作玻片进行镜检,以伪短体线虫成虫形态鉴定特征为主要的结果判定依据,其生物学特性、寄主范围、地理分布可作为辅助判定依据。5符号和缩略语L虫体体长(mm或

6、.uti)。a——体长/最大体宽。b——体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离。b,—体长/虫体前端至食道腺末端的距离。c体长/尾长。C,——尾长/丿JT-门处体宽。St.——口针长度(pm)oSp.——交合刺长度(Mm)oGub.引带长度(pm)oV——虫体前端至阴门的距离x100/体长。6仪器设备和主要试剂6.1仪器设备和用具生物显微镜(40倍以上系

7、列倍数)、体视显微镜(10倍以上,具透射光源)、电热恒温箱、载玻片和凹玻片、盖玻片、分样筛(100目、500口)、烧杯(500mL>1000mL).漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镀子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸或卫工纸、酒粕灯、钟而皿或培养皿、加热板、T•燥器、试管。6.2主要试剂4%甲醛、指甲油、乳酚油(苯酚20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸憾水20mL混合而成)、石蜡。7线虫鉴定7.1症状检查对花卉、观赏植物、果树和蔬菜等植株和根系进行检杳,注意检杳是否有叶片萎着、植株矮化、根系变褐和坏死等症状。7.2样品分离按照GB/T248

8、28分离样品。7.3线虫分离按照GB/T24828分离线虫。7.4显微镜检查按照GB/T24828制作临时玻片,在显微镜下观察线虫的形态结构。按照GB/T24828制作永久玻片,在显微镜下进行线虫形态测计,拍摄显微照片,进行形态鉴定。7.5形态鉴定特征7.5.1短体线虫属形态鉴定特征按照GB/T24828o7.5.2伪短体线虫形态鉴定特征7.5.2.1测计值伪如体线虫的测计值见表B.Io7.5.2.2形态描述7.5.2.2.1雌虫雌虫形态特征如,——头环3个,平坦而模糊,头架骨化强,后缘伸达2个体环之后;口针较粗,基部球向前凸出,平坦或较尖;——侧

9、线4条,直到侧尾腺孔,Z后,变成3条,侧区内侧线间常有倾斜的短侧线;——受精囊圆形,有时无精了,较充满精了时窄长,示阴了宫

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