厌氧菌的微生物检验及临床意义

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1、厌氧菌的微生物检验及临床意义【屮图分类号IR446.5【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2013)12-0137-01【摘要】目的:探讨厌氧菌的微生物检验方法及临床意义。方法:选80例厌氧菌感染的标本采集、送检、检验方法及常见厌氧菌的快速鉴定进行分析。结果：80例感染标本屮厌氧菌培养阳性者24例，阳性率为30%。其中单纯厌氧菌阳性者10例，占阳性标本的41.6%；厌氧菌和需氧菌混合感染14例。6例为两种厌氧菌感染。结论：60%的感染与厌氧菌有关，有些部位的感染80%以上是由厌氧菌感染所致。厌氧菌标本的采集与送检,直接关系到实验室培养的

2、阳性率与准确性。対于厌氧菌感染，实验室诊断日益受到重视。【关键词】厌氧菌；标木采集立；送检；检验方法厌氧菌分布十分广泛是体内正常菌群的组成成员，正常情况下菌群之间保持着微生态平衡，厌氧菌代谢产生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌生长。选取80例感染标木中厌氧菌检验进行分析。1临床资料1.1一般资料木组为2012年3月〜2013年3月住院患者感染标木80例，男性48例，女性32例，年龄15〜73岁，平均年龄42岁。肺部感染20例，腹部水及腹腔引流液39例，胆汁14例，穿刺脓液7例。1.2方法1.2.1标本采集与送检标本采集后要立即送检，送检过程中也必须避免接

3、触氧气。标本送到实验室后，应在20〜30min内处理完毕，最迟不超过2h,以免其屮的兼性厌氧菌过度生长而抑制厌氧菌的生长。若不能及时接种，可将标木置室温下保存，切不可冷藏，因在低温时氧气的溶解度较高，不利于厌氧菌的生长。1.2.2厌氧菌的检验方法1.2.2.1肉眼观察每次接种前均应观察标本的性状，如是否为脓性、血性，有无黑色坏死组织或黑色分泌物，有无硫黄样颗粒，是否有恶臭等。1.2.2.2直接镜检除血液标木外，各种临床标木在接种前均须直接涂片，做革兰染色后镜检，以观察细菌的染色性、形态特征以及标本中的菌量，以供分离培养、判断结果时参考。1.2.2.

4、3分离培养初代培养常用方法有厌氧罐法、气袋法和厌氧手套箱法等。前两种方法比较简便，不需特殊设备，适用于小型实验室，后一种方法设备较为复杂而昂贵，但效果最佳。尽量使用新鲜培养基，并在2~4h内用完。使用前放入无氧环境，预还原处理24~48h。可采用预还原灭菌法制作的培养基。若为液体培养基,在使用前必须煮沸10min以驱除溶解氧，并迅速冷却后接种细菌。标本经48h初代培养后，用放大镜观察平板上的菌落性状。每个平板挑选5个不同性状菌落，每个菌落分别接种2~3个平板，每个平板划分4〜6个区，分别作儿个菌落的次代培养。然后分别放入有氧、无氧和含5%〜10%二

5、氧化碳环境中培养48ho如在有氧、无氧环境中均能生长为兼性厌氧菌；如在有氧、无氧环境中均不生长或生长不好，而在二氧化碳环境生长最好为需二氧化碳菌；如在有氧下生长而在无氧下不生长则为需氧菌；在有氧环境中不生长而仅在厌氧环境中生长即为专性厌氧菌。2结果80例感染标木中厌氧菌培养阳性者24例，阳性率为30%。其中单纯厌氧菌阳性者10例，占阳性标本的41.6%；厌氧菌和需氧菌混合感染14例。6例为两种厌氧菌感染。厌氧菌在某些特定条件下，可引起人体的内源性感染。60%的感染•与厌氧菌有关，有些部位的感染80%以上是由厌氧菌感染所致。3讨论对庆氧菌的感染，常规

6、细菌培养方法不能检出，常用抗菌药物也多无效果，是临床上许多疑难杂症，如“无菌性感染或脓肿”、“原因不明的发热”，以及某些感染性疾病迁延不愈和反复发作的重要原因之一。在发生菌群失调或机体免疫力下降或细菌进入卄•正常寄居部位时，这些厌氧菌即可作为条件致病菌而导致内源性感染。厌氧菌标木的釆集与送检，直接关系到实验室培养的阳性率与准确性。标本的采集与运送是否适当，对厌氧菌培养能否成功至关重要。厌氧菌的标木采集的原则是要求标木绝对不能被正常菌群所污染，采集时尽量避免接触空气。临床在进行厌氧菌培养前还应与实验室联系，以便实验室做好接种培养的准备[1]O标木应从

7、正常无菌部位或通过严格无菌技术采集，用特殊技术或方法釆取的标本，必须通过用于厌氧菌正常栖居地才能取到的标本，如痰、支气管镜采样（无特殊保护套）、咽拭子、排出的尿及阴道拭子不能做厌氧菌培养；粪便标木厌氧菌培养，只能做难辨梭菌及内毒杆菌的培养。最好是床边接种，如无条件床边采样时，尽快将空针中的气体排尽，用消毒空针抽取厌氧培养标本，将针头插入无菌橡皮塞。或将标本插入运送培养基屮送细菌室培养。标本送到实验室后，应在20〜30min内处理完毕，最迟不超过2h,以免其中兼性厌氧菌过度生长而抑制厌氧菌的生长。如果一时来不及接种，可将标本置室温下保存。标本不宜冷藏

8、，因冷藏对某些厌氧菌有害，而且在低温时氧的溶解度较高。每次标本接种前均应观察标本的性状，包括标本的气味、是否脓性、带血或腐