毒理学基础实验指导

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1、卫生毒理学实验指导编写:陈秉符古雅2009年3月实验一毒理学实验设计1实验二实验动物的一般操作技术10实验三灭多威经口急性毒性试验20实验四苯经呼吸道急性毒性试验24实验五蓄积毒性试验27实验六亚慢性和慢性毒性试验29实验七小鼠骨髓细胞微核试验33实验八小鼠精子畸形试验37实验九骨髄细胞染色体畸变分析40实验十鼠伤寒沙门菌回复突变试验42实验十一致畸试验及胚胎胎仔检查方法47实验十二网织红细胞计数53附录:动物实验报告的撰写及注意事项54实验一毒理学实验设计一、目的和意义毒理学的很多研究工作需要通过动物实验来进行。使用实验动物进行科研的优点是花费人力

2、、物力较少,时间短,易发现单因素与结果的关系,能提供大量有价值的可与人类生命活动现象相类比的资料。在毒理学实验研究屮,健康的实验动物是保证工作顺利进行和获得正确可靠的研究结果的重要条件。毒理学研究外源化学物对于机体(特別是人体)的冇害作用及其机制。毒理学研究的主要手段是动物实验。体内试验是以实验动物为模型,最终目的是通过外源化学物対实验动物的毒性反应,向人(原型)外推,以期评估外源化学物对人的危害及危险性。体外实验主要川于筛选和预测急性毒性和机制研究;人体实验和流行病学调杏则可进一步深化和证实在动物实验屮所得到的资料。实际上,毒理学作为一门实验科学是

3、以动物实验为中心的,毒理学动物实验的设计、实施、结果观察和评价是毒理学研究的基本方法。通过木次讨论,要求学生基木掌握毒理学实验设计的原则和方法。二、内容(-)毒理学实验的原则和局限性1、毒理学实验的原则在毒理学的试验中,冇三个基本的原则。第一个原则,化学物在实验动物产生的作用,可以外推于人。第二个原则,实验动物必须眾露于髙剂量,这是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。第三个原则,成年健康(雄性和雌性未孕)的实验动物和人可能的暴露途径是基木的选择。2、毒理学实验的局限性用实验动物的毒理V实验资料外推到人群接触的安全性时,会有很人的不确定性。(-)毒理

4、学常规毒性试验的基本目的毒性评价或安全性评价方面的基木n的包括以下儿点:1.受试物毒作用的表现和性质。2.剂量■反应(效应)研究。3.确定毒作用的靶器官。4.确定损害的可逆性。毒理学研究还可能冇其他的FI的和要求,例如毒作用的敏感检测指标和生物学标志、毒作用机制研究、受试物的毒物动力学和代谢研究、中毒的解救措施等。对这些要求,应扩展常规试验的设计以包括有关的项目,或者另外设计和进行靶器官毒理学研究及机制毒理学研究。(三)实验动物的选择毒理学的动物实验是以实验动物作为研究对象的,为获得可靠的研究结果,先决条件是正确地选用实验动物。1、实验动物物种的选择

5、对实验动物物种选择的基本原则是:选择对受试物在代谢、生物化学和毒理学特征与人最接近的物种;自然寿命不太长的物种;易于饲养和实验操作的物种;经济并易于获得的物种。在毒理学研究屮常用的实验动物物种如下:人鼠、小鼠、豚鼠、兔、狗。其他可能用到的实验动物有地鼠、稠猴、小型猪、鸡等。常用实验动物生物学和生理学参数见表1-1。以上实验动物各物种中,实际上没有一种完全符合上述物种选择的原则,目前常规选择物种的方式是利用两个物种,i种是啮齿类,另i种是非啮齿类。系统毒性研究最常用的啮齿类是人鼠和小鼠,非啮齿类是狗。豚鼠常川于皮肤刺激试验和致敏试验,兔常川于皮肤刺激试

6、验和眼刺激试验。遗传毒理学试验多用小鼠,致癌试验常用大鼠和小鼠,致畸试验常用大鼠、小鼠和兔。迟发性神经毒性试验常用母鸡。表1・1常用实验动物生物学和生理学参数参数猴狗猫兔大做小做豚鼠地B成体体U£(kg)3.514.03.33.70.450.0350.43().12寿命(a)161514631.531水消耗(ml/d)4503503203(X)3561453()饲料消耗(成本g/d)15()4(X)KX)18()105121()成体代谢(cal/kgd)1588080110130600100250体温(°C)38.838.938.6391438123

7、7.43&638.()呼吸频率502025538516090S3(次/min)(40-60)(10〜30)(20〜30)(40〜65)(65〜110)(80-240)(70〜100)(35〜130)心率(次/min)2(X)KX)1202(X)3286(X)30()450血压mmHg159/127148/KX)155/KX)11()/8()130/90120/7577/50108/77(收缩/舒张)出/

8、:•体車(g)500-70()1100〜2200125KX)5-61.575〜10()2.0断乳时体重(g)44(X)58(X)30(X)100〜1

9、50040〜5010〜1225035开眼(d)出生当天8〜128〜121010〜1211出生当夭15妊娠(d

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