生物专业综合实验i实验指导-课程平台-兰州理工大学

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1、兰州理工大学专业综合实验1实验指导书（四年制生物工程专业）王永刚编写生命科学与工程学院二零一二年十月实验注意事项3实验一分子生物学基本技术简介5实验二实验准备及实验规范训练6实验三PCR引物设计及载休构建7实验四DNA琼脂糖凝胶电泳10实验五脱氧核糖核酸的测定13实验六原核细胞DNA的制备与定量15实验七真核细胞DNA的制备与定量17实验八PCR基因扩增及扩增产物的回收20实验九大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化23实验十质粒DNA提取及酶切鉴定27实验^一DNA的连接转化及阳性克隆的筛选31生物工程专业综合实验I实验指导实验注意事项实验中培养学牛対科学研究工作的严肃态度、严格地要求、

2、严密的工作方法和实事求是的作风，并初步具备客观地对事物进行观察、比较、分析、综合和解决实际问题的能力。为达到上述冃的，要求做到以下儿点：实验前：1•仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原理；2.结合实验内容，复习有关普通生物学、生物化学、分子生物学等方面理论知识，做到充分理解；3.预测实验屮各个步骤可能出现的悄况；4.注意实验中可能发牛■的问题实验111:1.将实验仪器妥善安排，正确装置；2.严格按照实验指导上的步骤进行操作，防止人员、坏境污染；3.认真、细致地观察实验过程屮出现的现象，随时记录各项指标；4.爱护仪器设备和用具，节约药胡、试剂及水电，保持实

3、验室的安静整洁。试验后：1.整理实验结果，经过分析思考，写出实验报告，按时交给指导老师；2.整理实验仪器清洗干净后妥善放置；3.做好实验室的清洁卫牛•工作。实验报告的内容要求：1.通过木课程的实验和实习，培养学生理论联系实际、严肃认真、实事求是的科学态度，要求遵守纪律、安全操作，确保实习实验顺利进行。2.实验前必须了解实验宗习内容和有关课程内容，切确实验目的、操作规范、认真，独立思考、认真观察，做好记录，按时完成实验实习并按规定完成实验实习报告。3.实验报告的内容主要包插实验冃的、原理、材料、操作规程及实验结果。所冇实验应准确记录各实验技术参数，并对实验结果进行讨论。注意：提交实验预习

4、报告，预习报告不是千篇一律的抄袭实验讲义，可以利用简要的示意图勾画出实验步骤，同吋标注出每一步骤的注意事项、目的以及自己不清楚的问题。课程成绩由考勤、预习报告、课堂提问、实验操作动手能力、实验报告等部分构成。实验一分子生物学基本技术简介一、目的1、系统回顾分了生物学实验技术的发展。2、了解现今分子生物学实验的发展现状和应用。二、内容二十一世纪是以分子生物学为代表的牛命科学的世纪，分子生物学的基本理论和实验技术己渗透到生物学和医学的各个领域并促进了一批新学科的兴起和发展。以分子生物学为基础的基因克降重组技术是现代生物技术的中心。分子生物学基本技术课程的开设力求全面、系统地培养学生分子生物

5、学实验的操作能力，通过此实验技术教学使学生掌握现代分了生物学技术的基木实验操作，从而更进一步加深理解和巩固所学的分了生物学课程的理论知识,更重要的是通过分子牛物学基本技术课程的学习，可使每个研究牛结合学到的技术方法更好地完成口己的科研设计同时提鬲科研课题研究的技术水平，培养学生独立分析问题和解决问题的能力以及实事求是的科学态度。分子生物学技术作为现代生物技术中最为先进的实验手段z—，已经广泛渗透到生命科学的各个领域，对于牛命科学的研究起到了重要作用。主要包括聚合酶链反应（PCR）蛋口质免疫印迹（Westernblot）、分了杂交技术以及基因克隆等实验技术的教学，使学生了解分子生物学技术

6、发展的现状及应用，学握现代分子牛:物学技术的基木操作技术，并通过本课程的学习，使每个学生结合学到的技术方法能更好地完成口己的科研设计，同时提高科研设计的水平。这门课程开设的实验以综合性为主，涵盖面广，几乎包括一般分子生物学研究会涉及的所有内容：最基本实验技术，如琼脂糖凝胶电泳检测DNA；基因克隆所要用到的技术，如质粒提取、DNA重组及重组子筛选、细菌感受态的制备及转化、外源基因的诱导表达等；还有一些其他的常，用技术，如动、植物基因组DNA的提取、植物总RNA的捉取、PCR扩增、蛋白质印迹、Southern杂交等。三、参考文献①J.萨姆布鲁克，主编.分了克隆实验指南（第三版）.科学出版社

7、，2003.②FM奥斯伯，主编.精编分子生物学实验指南（第四版）.科学出版社,2005.③C.W.迪芬巴赫，主编.PCR技术实验指南（第二版）.化学工业出版社，2006.④MichelMorange.AHistoryofMolecularBiology.HarverdUniversityPress,2000⑤RobertF.Weaver.MolecularBiology.McGraw-HillCompanies,2001实验二实验准备及实验规范