香菇中提取多糖的技术研究

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1、香菇中提取多糖的技术研究香菇中多糖的作用一在民间素有“山珍”之称。香菇属于高蛋白，低脂肪，高碳水化合物，高纤维素营养食品［1］。香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒、提高免疫力和刺激干扰素形成等功能［3］,其毒副作用小，疗效高，具有重要的研究和开发价值。香菇(Lentinusedodes)是侧耳科(Plearataco)的担子菌，含有多种有效药用组分，尤其是香菇多糖(Lentinan简称LNT)是1种宿主免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能］，而引起人们的广泛关注。香菇中含有一种能治疗癌症，抗恶性肿瘤，抗病毒，抗感染’提高人体免疫力等多

2、种生理功能的物质香菇多糖。医学研究证明，它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高，由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。它的作用是间接的，所以毒副作用小，在各类抗癌药物中，它被认为是毒副作用可以忽略不计，剂量低，疗效好的天然的理想药物-：采用亚临界水技术提取方法，考察了提取香菇多糖的最佳试验条件。结果表明，最佳捉取条件为亚临界水温度150°C，液料比30mL•g-1,浸提时间为5min,浸提次数为2次，在该条件下香菇多糖得率可达15.7%,与热水恒温浸提法相比，亚临界水浸提法可明显降低提取时间和提高香菇多糖得率。传统提取香菇中的多糖主要利用热水

3、浸提法，这种方法不仅浸提时间长，而且提取率不高。本试验釆用亚临界水提収方法，所谓亚临界水也被称为过热水、高压热水或热液态水。当水在374.2°C和22.1MPa以上的高温、高压条件下，可形成既非液休又非气体的第四状态，即所谓“超临界状态”。在此状态下的水称为“超临界水”。在稍微低于此温度和压力下的水称为“亚临界水"[4]o同传统的提取方法相比，亚临界水提取具有如下特点[5-6]：不论亚临界水提取对象是液体还是固体，其有效成分的溶解度要比传统方法高得多，提取率也就高得多；亚临界水提取在提取时间内几乎没有能耗，其作用效果迅速且能量消耗较少；亚临界水会使蛋白质、

4、淀粉等变性，给后续的分离、纯化带来方便。此种方法提取香菇多糖价廉、无污染且提取率高，是一种绿色萃取技术冃前国内香菇多糖的提取主耍是热水提取法、酸提法和碱提法，这些方法存在着提取工艺复杂，提取时间长和香菇多糖产率低等缺点，且消耗人量能源。近年來岀现了酶解法、超声和微波提取等新方法但值得我们注意的是，亚临界水的强分解力使得到的多糖小分子化，对多糖的活性会有一定的影响，盛国华资料还阐述，亚临界水的温度越高，处理时间越长，反应产物有抗氧化活性越高的倾向，以上内容有待进一步研究。娄冠群，张永忠，李振艳，等.亚临界水提取香菇多糖的工艺研究[J].东北农业大学学报,20

5、10(2):138-142.-：：:从不同方面对香菇多糖的分离、纯化条件进行了优化研究。结果表明:香菇颗粒的粒径为2-3mm,原料/7K(W/W)=1:20〜1:25时，乙醇终浓度在70%左右时效果最佳，可以得到较多的多糖粗品。BECM法脱蛋白的结果表明，杂蛋白的去除率为99.98%o甲醇分级沉淀后的多糖分为LI,L2,L3三个级分，分别测其比旋，并用酸完全水解L1?L2,L3,作纸层析结合苯酚一硫酸法的测定结果表明,L1A2,L3的葡聚糖含量分别为68.09%,79.25%,100%o比较自然干燥法'高温烘干法，真空低温冷冻干燥法的干燥结果发现，自然干燥

6、法耗时太长且干燥不彻底。而高温烘干法则会使多糖严重降解。真空低温冷冻干燥法虽然能耗较多，但条件温和，应是制备有活性生化制品的有效方法。原料的处理:粉碎法。具体分三种情况，一是将原料粉碎成可过80冃的筛子;二是将原料粉碎成直径为2-3mm的颗粒;三是不粉碎。1.2.2加水量的选择:设加水量分别为:原料/无离子水(W/W)=1：10,1：15,1：20,1：25,1：30o按上述比例分别进行蒸煮。1.2.3蒸煮温度的选择:设蒸煮温度分别为85,96,105,120°Co其中,前两个温度蒸煮3-5hrs,后两温度个蒸煮40-80MinSo1.2.4蒸煮物的过滤:

7、采用压滤法。1.2.5滤液的浓缩:采用热浓法。将滤液倒入浓缩锅中，在92-94°C条件下加热，直至滤液的体积降为原来的1/4—1/5为止。1.2.6多糖的沉淀与脱色:采用乙醇法。向浓缩液中加入95-99%的乙醇至50,60,70,80%饱和度。1.2.7多糖中的蛋白质杂质的去除:采用BECM法。即将正丁醇、乙醇、氯仿、甲醇、NaCI按一定比例混制成一种特殊的试剂，然后加到多糖溶液中。搅拌20-30Mins后静置6-10hrSo1.2.8多糖的分级纯化:用甲醇分级沉淀法。向多糖溶液中分别加入一定比例的甲醇,3OOOrpm离心15minso将分级的样品分别测其

8、比旋，并用酸完全水解，作纸层析。1.2.9多糖的干燥:分别采用口然