《棉花皱叶病毒检疫鉴定方法》编制说明1．目的和意义棉花皱叶病毒

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1、《棉花皱叶病毒检疫鉴定方法》编制说明1.目的和意义棉花皴叶病毒(Cottonleafcrumplevirus,CLCrV)属于双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus),是棉花上的重要病毒Z一，对棉花的生产有着严重威胁。该病毒于1954年首次在美国加利福尼亚洲的陆地棉上发现，目前分布于美国、中东、印度和墨西哥等地，可自然侵染陆地棉、Gossypiumspp.、Abutilonspp.、Althaeaspp.、Hibiscusspp.、Malvaspp.、Glycinespp.>Phaseolusspp.、Viciaspp.等多种重要经济作物

2、，导致受侵染作物持续花叶和畸形。自然界中靠介体昆虫以半持久方式传播，因此传播的机会很大。在我国，其寄主分布广泛，一旦传入，定殖扩散可能性很大。并且其寄主多为具有重要经济价值的作物，因此加强相关的基础研究和应用研究，建立检测标准，加强检疫检测非常必要。2007年5月29H中华人民共和国农业部第862号公告将该病毒列入《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》，依法对其实施检疫,因此开展本项目的研究，制定该病毒的检疫鉴定方法非常必要。标准编写组在查阅资料和深入研究的基础上，建立了棉花皱叶病毒的检疫鉴定方法，以成熟可靠规范化方法为依据起草标准，制定的标准适用于可能携带棉花皱叶病毒的植物

3、材料的检测。2.标准编制的主要工作过程2」任务来源本标准是由国家标准委下达的2009年国家标准制订项目计划，计划编号：2009B252*木标准由中国检验检疫科学研究院负责起草，浙江出入境检验检疫局和广东出入境检验检疫局参与起草。2.2立项研究阶段该标准立项后，标准起草小组成员便开始进行调研工作，通过多种方式和渠道收集有关棉花皱叶病毒检疫鉴定方法的相关资料，对棉花皱叶病毒的为害特性、牛物学特征、传播规律、各种检疫鉴定的方法等最新研究进展等有了全面深入的了解。通过研究建立了检测棉花皱叶病毒的实时荧光PCR方法，为该标准的制定打下了的基础。2.3起草阶段起草组认真阅读了标准制定的一系列文

4、件，对标准制定的格式、内容、术语表达方式等进行了深入的学习，较系统的学习了标准的编写，并根据GB/T1.1-2000《标准化工作导则第一单元：标准的起草与表述规则第一部分：标准编写》的要求进行标准起草。2.4征求意见阶段分别将标准的征求意见稿送发到相关科研单位、管理单位和口岸出入境检验检疫局等16个单位征求意见，根据反馈的意见进行了相应的修改。2.5标准的主要起草人及承担的工作张永江中国检骑检疫科学研究院，组织标准的调研和起草张明哲浙江岀入境检验检疫局,参加标准的调研和起草李桂芬中国检验检疫科学研究院,参加标准的调研和起草冯黎霞广东出入境检验检疫局,参加标准的调研和起草李明福中国检

5、验检疫科学研究院,参加标准的调研和起草中国检骑检疫科学研究院，参加标准的调研和起草1.标准主要内容的依据3.1范围本标准规定了棉花皱叶病毒检疫鉴定的基本原则和方法。木标准适用于可能携带棉花皱叶病毒的植物材料的检测。3.2原理棉花皴叶病毒的病毒粒体结构、生物学特性、血清学特征、慕因组特征是制订该检疫鉴定标准的依据。3.3仪器设备、实验用品及试剂根据棉花皱叶病毒检疫鉴定的需要而定。3.4棉花皱叶病毒检疫鉴定的方法根据棉花皱叶病毒的病毒粒体结构、生物特性、血清学和分子生物学特征，建立了检测该病毒的普通PCR检测方法及实时荧光PCR方法。3.5检测结果评定如被检样品的所有特性均与各鉴定指标

6、相吻合，可确定样品中含有棉花皱叶病毒。3・6样品保存与复核含有棉花皱叶病毒的所有样品、照片和实验记录都应妥善保存，以备复核、谈判和仲裁。1.主要参考文献1)Idris,A.M.，andBrown,J.K.Cottonleafcrumplevirusisadistinctwesternhemispherebegomovirusspecieswithcomplexevolutionaryrelationshipsindicativeofrecombinationandreassortment.2004.Phytopathology94:1068-1074.:2)Brown,J.K.，a

7、ndIdris,A.M.CottonleafcrumplevirusisthefirstmemberofapreviouslyundiscoveredphylogeneticgroupofWesternHemishperebegomoviruses.2002.(Abstr.)Phytopathology92(suppL):S38.3)Brown,J.K.,MihailJD.，andNelson,M.R.Theeffectsofcottonleafcrumpleviru