实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规检查或某

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1、实验研究中,经常要采集实验动物的血液进行常规检査或某些生物化学分析,故必须掌握血液的止确采集、分离和保存的操作技术。采血方法的选择,主要决定于实验的1=1的所需血最以及动物种类。凡用血最较少的检验如红、口细胞计数、血红蛋口的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉釆血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞

2、佃影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓

3、度,必须采取动脉血液。采血吋耍注意:⑴采血场所有充足的光线:室温夏季最好保持在25-28°C,冬季,15-20°C为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁T燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。现将采用血方法按动物和部位分别加以介绍。(一)小鼠、人鼠采血法1•割(剪)尾采血当所需血量很少吋采用本法。同定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45°C左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红

4、蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠-•般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,人鼠0.3〜0.5mlo2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),对采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10〜50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈

5、部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉从充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3〜4cm)碳质玻璃滴管(毛细管内径0.5・1.0mm),使采血器与鼠面成45°C的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜而对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2〜3mm,大鼠约4〜5mm。当感到有阻力吋即停止推进,同时,将针退出约0.l-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除左加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术

6、后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多人困难。左右两眼轮换更好。体重20・25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g人鼠每次可采血0.5-1.Oml,可适用于某些生物化学项目的检验。2.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2・4/5的颈部前剪断,让血白由滴入盛器。小鼠可采用约0.8〜1.2ml;大鼠约5-10mL3.心脏采血鼠类的心脏较小,几心率较快,心脏采血比鮫困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸

7、一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴鉤心脏,川针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2mlo4.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。5.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正屮线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚眾露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿银子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。8•股动(静)脉采血先

8、由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g小鼠采血约0,2-0.8ml,人鼠约0.4-0.6mlo(二)豚鼠采血法1.耳缘剪口采血将耳消毒后,用锐器(刀或刀片)割破耳缘,在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液,阻止血凝,则血可自切口自动流出,进入盛器。操作时,使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。1.心脏采血取血询应探明心脏搏动最强部位,通常在胸骨左缘的正中,选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血,其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体

9、佼小,一般可不必将动物固定在解剖台上,而可由助手握住前后肢进行采血即可。成年豚鼠每周采血应彳、超过10ml为宜。2.肌动脉采血将动脉仰位固定在手术台上,剪去腹股沟区的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切开长约2・3cm的皮肤,使股动脉暴露及分离。然后,用银子提起股动脉,远端结扎,近端用止血钳夹住

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