口蹄疫非结构蛋白研究进展

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1、口蹄疫非结构蛋白研究进展朱咏梅1,朱来华2,郑小龙2,王宫璞2,王琰2(1.青岛出入境检验检疫局,山东青岛266000;2.Lb东出入境检验检疫局,山东青岛266002)摘要:「I蹄疫(foot-and-mouthdisease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的在偶蹄动物间传播的烈性传染病,大多数发展中国家采取免疫接种來控制该病或建立无疫区,如何区分白然感染动物和免疫动物一直是控制和消灭该病的重要问题。人量的比较研究一致认为,以FMDV非结构蛋白(non-structuralprotein,NSP)为抗原

2、,检测动物体内的心P抗体是一种很好的区分感染动物科疫苗免疫动物的诊断方法。但因疫苗中残留的WP或非特异性应激因素亦可引起假阳性反应,许多国家特别是泛美地区普遍联合采用3-ABC-ELISA或酶联免疫电转印试验(Enzyme-LinkedImmunoelectrotransferBlotTest,EITB),并得到了OIE的认可,已成功应用于南美国家口蹄疫扑灭计划。关键词:口蹄疫病毒;非结构蛋白;鉴别诊断中图分类号:S852.659.6文献标识码:A文章编号:1005-944X(2011)05-0083

3、-04FMD是rflFMDV引起的偶蹄类动物烈性传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列入必须通报的动物疫病。该病传播快、宿主范围广、发病率高,对畜牧业发展构成极大威胁。近年来我国畜牧养殖业发展迅速,口蹄疫是重大的潜在威胁。与发达国家通常采取的扑杀政策不同,发展中国家普遍采用免疫的方法來控制该病。因此,如何快速、可靠地区分免疫动物和感染动物,对于FMD的防制以及国际贸易尤为重要。基于动物感染FMDV后,既能产生结构蛋白抗体,又能产生NSP抗体,而疫苗免疫动物主要诱导机体产生FMDV结构蛋白抗体,与结构

4、蛋白相比,非结构蛋白的变界较少,相对保守【1】。在FMD诊断屮,区分免疫动物和自然感染动物是一项十分重要的内容,鉴别自然感染动物和免疫动物也是0IE判泄一个国家有无FMD流行的依据。近年來,陆续建立了检测FMDVNSP抗体的诊断方法,以区分FMDV感染动物和注射疫苗动物。以下就FMD中NSP的研究进展综述如下。1FMDV相关NSP的种类FMDV的NSP是指除了衣壳蛋白1A、1B、1C、1D和它们的前体蛋白之外的所有由病毒编码但不参与病毒衣壳组成的蛋白,包括成熟蛋白L、2A、2B、2C、3A、3B、3C

5、、3D以及它们的前体。NSP参与病毒的复制、多聚蛋白的裂解和病毒颗粒的组装过程。其111L和3C能抑制宿主细胞的蛋白合成,在病毒蛋白的成熟裂解过程中作为蛋白酶裂解聚蛋白,2A为P1/2A间裂解提供识别序列2BC、2C、3AB和3CD形成复制复合物,为病毒RNA的合成创造条件,与装配有关⑴。1966年Cowan等日发现一种病毒非结构蛋白抗原(即3D)仅与感染动物血清反应,由此建立的免疫扩散试验与动物食道咽部病毒分离技术相结合,曾被认为是一种可靠的鉴别诊断方法。但后来发现,反复接种灭活疫苗的动物体内会不同

6、程度地产生抗3匚抗体,该方法受到质疑。近年来,开始研究用其他非犀构蛋白取代3D来区分注苗动物和感染动物。Berge等【3】研究发现,血清中存在NSP抗体可以作为感染FMD康复动物的标志,若血清中同时存在至少2利NSP抗体(3D抗体除外)就可以断定该动物感染过FMDV,但如血清中不存在一种或所有的NSP抗体,并不能肯定该动物从来就没有感染过FMDVoRodriguez等冋对感染FMDV的猪和疫苗接种猪体内的NSP免疫原性及特异性进行了研究,发现3ABC抗体是由活FMDV在体内诱导产生的,因此3ABC最适

7、合用于鉴别FMDV感染猪和疫苗接种猪,并指出抗3ABC抗体在感染后2周即可检测到。Lubroth等冋发现,血清中2C和3ABC抗体的存在可作为区分FMD恢复动物(带毒者)和疫苗接种动物。Mackey等冋指出,2C、3A、3ABC抗体的存在也可以作为鉴别感染和疫苗接种动物的指标,并且对于牛和猪血清,3ABC是最为可靠的、可单独使用的指标。抗3ABC抗体在感染后早期就出现,并且在血清中维持可被检测水平的时间比任何其他的NSP都长20世纪90年代以来,各国研究者通过对2C、3A.3ABC等FMDV非结构蛋白

8、的深入研究,发现针对F3ABC.3B的血清抗体水平可以作为区分免疫动物和感染动物的指标。在现代疫苗加工过程中,2C、3A、3B和3C等非结构蛋白会被去除,因此免疫动物体内不会产生针对NSP的抗体,只会诱导产生针对病毒衣壳蛋口的抗体。而当动物感染FMDV并出现病毒复制后,无论表现为临床或亚临床症状,动物都会出现2种抗体,一•种是针对衣壳蛋白的抗体,一种是针对NSP的抗体,后者可以用来区分免疫动物和感染动物冋。2通过测定NSP抗体区分感染动物和注射疫苗动物的

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