一株烟草青枯病生防菌的筛选鉴定及其发酵优化

一株烟草青枯病生防菌的筛选鉴定及其发酵优化

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1、一株烟草青枯病生防菌的筛选鉴定及其发酵优化摘要:以烟草青枯病原菌[茄科雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)]为筛选指示菌,采用平板共培养初筛和发酵上清滤液复筛的方法,筛选到烟草青枯病拮抗菌株XLA03,其抑菌圈直径为13.74mm;经16SrDNA鉴定,菌株XLA03为解淀粉芽砲杆菌(Bacillusamy1oliquefaciens)o市单因素试验和正交试验优化得到了菌株XLA03生物量较高的摇瓶发酵培养基配方为玉米淀粉15・0g/L.豆粕50.0g/L.K2HPO4・3H2O1.0g/L.MgS04・7H2O0.75g/L、MnSO4・H2O0.010g

2、/L;培养条件为起始pH7・0,接种量1%,装液量20mL/250mLo关键词:烟草青枯病菌(Ralstoniasolanacearum);解淀粉芽抱杆菌(Bacillusamyloliquefaciens);筛选;发酵优化中图分类号:S435.72;TQ458文献标识码:A文章编号:0439—8114(2014)08-1810—05ScreeningandFermentationOptimizationofAntagonisticBacillusagainstTobaccoBacterialWiltZHAOXiao-yanl,YANGHuan2,CHENJian-gangl

3、,WANGChang-jun3,JIZhi-xial,CHENShou-wenl(1.StateKeyLaboratoryofAgriculturalMicrobiology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China;2・WuhanLeyangBiotechnologyCo.,Ltd・,Wuhan430071,China;3・HubeiTobaccoResearchInstitute,Wuhan430030,China)Abstract:Onebacterialstrainwasscreenedforitsantagon

4、isticact♦1VityagainstRa1stoniaso1anacearumbasedonthesize0fthebacteriostaticcircleinV•1trobythedualcu1tureandcu1turefiltratetestsandnamedasXLA03.ItSbacter■10stat■1cc■1rc1ec0u1dreach13mm.Acc0rdingt0determinat1onandanalysisof16SrDNA,thestra1nXLA03w;as•1dentifiedasBaci11us;amy1011quefaciens•Bas

5、ed0nthesing1efactorexPer1mentsandorthogona1exPeriments,an0Ptima1fe!rmentationmed•1umf0r•1tsbiomass-Pi、c»duct•1oninflaskswascomposedofmaizestarch15.0g/L,soybeanmeal50.0g/L,K2HP04・3H201.0g/L,MgS04・7H2O0.75g/L,MnSO4・H2O0.01g/L.TheoptimalfermentationconditionwasinitialpHof7.0,inocu1umsizeof1%lo

6、aded1iquidof20mL/250mL.Keywords:tobaccobacterialwilt;Baci11usamyloliquefaciens;screening;fermentationoptimization烟草青枯病[病原物为茄科雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)]是一种典型的维管束病害,最显著的发病症状是烟草植株出现枯萎现象,危害期大多出现在烟草旺长期或者旺长期以后,根、茎、叶部均会受害[1,2]。经常发病产烟区的老病田或早地烟田几乎每年都会发生,形成绝产无收和全田发病的现象,造成大面积烟草产量、品质下降,制约着烟草产业的发展[3]。

7、目前防治烟草青枯病的方法主要包括化学防治、生物防治、加强栽培管理和选用优质的抗病品种[4-7],但这些方法均无法杜绝该病的发生。生产过程中一般以种植抗性烟草品种和轮作为基础,同吋加强大田栽培管理,通过化学药物辅助保护的综合防治技术控制病害发生。由于消费者对烟草品质的要求逐步提高,对烟草成熟期病害的防治不宜采用有残留的化学约剂,而使用拮抗细菌防治植物病害能达到无公害防治的目的[8,9]o国内外关于拮抗细菌防治植物青枯病的报道涉及的半防细菌主要有芽抱杆菌、假单胞菌、链霉菌等。其中芽鞄杆菌是一类好氧和兼性厌氧

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