青枯雷尔氏菌芽胞杆菌生防菌的筛选及其鉴定

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1、青枯雷尔氏菌芽胞杆菌生防菌的筛选及其鉴定I刘国红"，刘波*】，林乃锥2(1福建省农业科学院农业生物资源研究所,福州350003；2福建农林大学,福州350002)摘要：从福建省反泰市采集土壤样本中筛选到了1株对青枯雷尔氏菌强致病菌株具有强拮抗作用的芽胞杆菌，其编号为FJAT-B菌株。抑菌圈试验表明该菌株对靑枯宙尔氏菌具有鮫稳定的抑菌效果。经过形态特征、生理生化特征、16SrRNA和ITS鉴定及全细胞脂肪酸分析表明该芽胞杆菌生防菌FJAT-B为解淀粉芽胞杆菌Bacillusamyloliquefaciens«.该生防菌的最佳牛长pH为7-8,培养36h时达到对数生长期，

2、生长量随着盐浓度增加生长逐步降低。关键词：青枯雷尔氏菌；生物芽胞杆菌；多相分类鉴定ScreeningandidentificationofanantagonisticBacillussp.againstRalstoniasolanacearumGuohongLiu1,2,BoLiu1,NaiquanLin2(1institueofagricultural-resourceFujianacademyofagriculturalsciencesfuzhou350003;2Fujianagricultureandforestuniversity,fuzhou350002)A

3、bstract:AbacteriastrainFJAT-B,suppressedRalstoniasolanacearumgreatly,wasisolatedfromsoilsamplescollectedinchangtaitownFujanprovince,andhadthestableinliibitoryeffectonR・solanacearumbytheinhibitionzonetest.Accordingtothecharacteristicsofmorphology»physiologyandbiochemistrytests,thecompari

4、sonof16SrRNAandITSsequenceandcelluarfattyacidanalysis,strainFJAT-BwasidentifiedasBacillusamyloliquefaciens.OptimalgrowthofthestrainFJAT-BwasatpH7-8,growthwastologarithmicphaseafter36h,andgraduallyreducedbyincreasingsaltconcentration.Keywords:Ralstoniasolanacearum;BiocontrolBacillusspeci

5、es;polyphasicidentification引起包括作物与林木毁灭性青枯病的病原菌HL■青枯雷尔氏菌过去分类上一直属假单胞杆菌属(Pseudomonas),Yabuuchi等⑵根据该菌16SrRNA序列、DNA・DNA同源性、脂肪酸组成等特征,将其置于伯克氏菌属(Burkholderia),后來通过系统发育与多相表型分析又发现其不同于伯克氏菌谱系，因此移入一个新属Ralst(mia[3]o由青枯雷尔氏菌^Ralstoniasalancicearum)引起的植物青枯病是一类世界性的土传植物病害，其危害垂、损失人、分布广，我国的四川、浙江、福建、江西、广东、广西

6、等省区发病较严垂。目前对该病原菌的防治主耍釆用化学药剂为主，但长期使用不仅造成牛态坏境严亜污染，而且直接增加农产品有毒化学物质的残留量，对人类健康带来危害。牛物防治对人畜安全、环境兼容性好、病菌不易产牛抗药性，因而引起人们的重视，并初见成效。项目资助：国家973项目前期研究专项(201ICB111607)；农业部“引进国际先进农业科学技术”重点项目(948项目)(2011-G25)；"十二五”农村领域国家科技计划课题863(2012AA101504).第一作者：刘国红，女，博上牛，1983年，主要从事芽胞杆菌分类及其功能研究。E-mail:liuguohong624@

7、sina.com.通讯作者:刘波■研究员°主要从事农业微生物技术研究。E-mail:fzliubo@163.com.收稿日期：：回复日期：。土壤中含有丰富的芽胞杆菌，芽胞杆菌产生的活性物质对病原菌生长也有一定的抑制作川，研究芽胞杆菌对植物病原菌的抑制作用，对于开发微生物制剂有着十分重要的意义。己报道的青枯病牛防菌主要有芽胞杆菌和无致病力青枯菌等金叫传统的芽胞杆菌牛防菌筛选方法大多是以纯化好的菌株为靶标进行牛防菌筛选，此法工作量大，费时费力，效率低。为了提高牛防菌筛选效率，本文作者建立了-•种新的筛选方法，即先将病原菌青枯雷尔氏菌菌液与培养基混合后倒板