猪瘟基因工程疫苗探究概况

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1、猪瘟基因工程疫苗探究概况摘要：猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种烈性传染病，对现代养猪业带来了极大的经济损失。目前，猪瘟的防控形势日益加剧，传统的猪瘟疫苗已不再适应需求，因此,猪瘟基因工程疫苗的研究越来越备受关注。本文就对猪瘟基因工程疫苗的研究、发展及其应用作了简要介绍。关键词：猪瘟基因工程研究概况猪瘟发病迅速，死亡率高，可以感染所有日龄的猪，给养殖场（户）带来了极大的经济损失。随着分子生物学技术的发展，特别是对4种结构蛋白［C、Erns（EO）、El、E2］的研究越来越深入，揭示了其编码基因、氨基酸组成

2、、免疫原性［1］等特征，为猪瘟基因工程疫苗的研究开启了先河。1猪瘟基因工程疫苗的研究1.1亚单位疫苗在猪瘟病毒的众多保护性抗原中，E2蛋白具有极好的抗原性，使免疫猪能抵抗致死量强毒的侵袭。由于E2蛋白的最佳表达系统为真核细胞，因此，利用真核细胞表达系统表达的E2蛋白为抗原，制备的亚单位疫苗，具有较好的保护力。DeSmit等［2］成功研制了E2蛋白基因工程亚单位疫苗，分组对猪进行1次或2次免疫，然后通过一系列攻毒试验后进行猪体解剖，表明仅仅在进行了2次免疫的猪的胎儿内没有病毒的存在。因此，猪瘟亚单位疫苗产生抗体

3、效价还较低,保护力还远远不够，该疫苗在实际应用中还有很多问题急需探索和解决。1.2合成肽苗多肽疫苗是通过化学合成法人工合成病原微生物的保护性多肽，再加入佐剂制成的疫苗。多肽疫苗由于完全是合成的，不存在毒力回升或灭活不完全的问题，已成为一种新型的疫苗。Dong等［3］报道成功研制出猪瘟合成肽疫苗，该疫苗的保护性多肽为5段猪瘟石门株B/C区的693-777位氨基酸，并且进行了科学的致死剂量的攻毒试验，结果表明免疫猪无发病致死现象，抵御了强毒的攻击，该多肽疫苗能使免疫猪产生很高效价的抗体，具有很强的保护力。1.3活

4、载体疫苗目前，应用最为广泛的基因重组疫苗的载体是痘苗病毒，该病毒对宿主的选择性较小，具有较小的毒力。由于痘苗病毒毒力较低，因此将猪瘟E2基因插入痘苗病毒载体，进行基因重组成功研制的疫苗，能使免疫的动物产生高滴度的抗体，具有很好的保护作用。Moormann等［4］于2000年利用基因重组技术将原来的低毒力E2基因替代为具有强毒力的E2基因，成功完成了新型的重组猪瘟病毒的研制。此重大创新为研究猪瘟病毒的基因结构、复制、重组和免疫应答开创了新的局面。在2000年Hahn等［5］通过试验研究，成功构建了猪瘟杂交病毒，

5、并且通过一系列攻毒试验，表明该杂交病毒的毒性已大大降低，基本无致病性。虽然此疫苗具有诸多优点，但是在生产实践运用中仍然发现有很多不足之处。该疫苗是人为利用基因重组技术研制的，再加上病毒的发生和变异又极其复杂，因此该病毒在自然界中，很有可能发生突变，对人和动物的生命及健康带来不可估量的灭顶之灾。1.4亚单位标记疫苗亚单位标记疫苗是以基因工程表达的猪瘟病毒保护性抗原为疫苗，而以检测猪瘟病毒的另外的结构蛋白的血清学技术作为检测手段，以区分免疫抗体和感染抗体。因为针对猪瘟病毒E0的抗体的产生是来自于自然感染的猪，而不

6、是来自于猪瘟病毒E2蛋白亚单位疫苗接种的猪，所以现在大量运用的检测方法的抗原是E0基因表达蛋白。VanRijn等［6］在试验研究中成功完成了猪瘟亚单位标记疫苗的制备，而该疫苗是基于猪瘟病毒E2区域的成功表达，并且用此疫苗接种猪，能使其产生高滴度的抗体，具有很高的保护作用。1.5基因缺失疫苗基因缺失苗是利用重组DNA技术去掉病毒致病基因组中的某一片段，使缺损病毒株难以自发地恢复成强毒株，但并不影响其增殖或复制，且保持其良好的免疫原性，从而制备成免疫原性好且十分安全的基因缺失苗。在2004年Mayer等⑺利用重组

7、DNA技术，去掉CSFVAlfoa/187（中等毒力株）和Eystrup株（强毒株）基因组中致病性很强的片段，研制成功了毒力较小的能诱导机体产生中和抗体的Npfo基因缺失病毒。试验研究中用这种新构建的毒株免疫接种猪，并用致死剂量的强毒株攻毒，结果免疫猪无发病致死现象，表明Npfo基因缺失病毒具有良好的免疫原性，可运用于安全性高的基因缺失疫苗的制备。2展望与传统疫苗相比，基因工程疫苗具有其特有的优点：把保护性抗原基因插入载体的能力，修饰的载体能表达来自病原微生物的保护性抗原基因，细菌和病毒载体都能产生兼有活疫苗

8、和灭活苗优点的疫苗。这种类型的疫苗具有亚单位苗的安全性又具有活疫苗的效力，易于大规模使用（喷雾或气雾），生产费用相对较低，某些基因工程疫苗不含有核酸等遗传物质，大大降低了核酸污染的可能性[8]。因此，现阶段对基因工程疫苗的研究显得越来越迫切。参考文献：[1]徐志文，郭万柱，石谦。猪瘟病毒基因组及基因工程疫苗研究进展[J].四川畜牧兽医，2005,3：31-33.论文代写[2]BoumaA,DeSmi