上海交通大学遗传学上午7组果蝇杂交实验方案

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1、杲蝇杂交实验方案1・实验的目的：1丄验证基因伴性遗传的规律1.2验证基因连锁与交换规律并计算重组值2•实验材料：2.1黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）wmsnwmsnp：白眼，小翅，卷刚毛（XX）三隐性突变体雌果蝇+++红眼,长翅,直刚毛（XY）野生型雄果蝇2.2黑腹果蝇生活史femalemale卵第0天embryo幼虫第1天■.1stinstarlarva蜕皮2ndinstarlarva3rdinstarlarva2.3黑腹果蝇的饲养方法果蝇以酵母菌为主要食料，凡能发酵的基质都可做为果幌饲料。实验室里主

2、要用玉米。原种每2・4周换一次培养基，看到幼虫后就将成虫赶去。各品系之间避免杂交2.3研究的性状及显隐性红眼与白眼（w）,长翅与小翅（m）,焦刚毛（sn）与直刚毛，雄性与雌性，性梳和平衡棍。3•实验技术流程亲本的纯种培养杂交亲本的确定杂交的遗传式后代的性状观察与记录实验结杲的分析与讨论4.1亲本的纯种培养4.1.1亲本饲养瓶的准备准备好两个阳系的雌雄果蝇饲养瓶（野生型，突变型）4.1.2果蝇的麻醉与转瓶将两个品系的雌雄果蝇麻醉后进行挑选其中在野生型屮挑出3・4对，突变型屮挑出7-8对，分别培养，25摄氏度培养8天。4・2杂交1（

3、伴性遗传的观察）【8天后】4.2.1杂交用饲养瓶的准备4.2.2亲本处女蝇的挑选待培养瓶中出现蛹x点，并R呈黑色时，将两个品系的亲代果蝇麻醉弃去：野生型品系继续培养，待用；突变型需要分离雌果蝇培养处女蝇。x+12h将孵化的突变型成蝇麻醉后分岀雌蝇，转至另一培养瓶，培养处女蝇待用。x+nl2h每隔12小时挑选一次处女蝇,直至挑出10只。4.2.3雄性果蝇的挑选麻醉野生型品系，挑出10只雄果蝇，放入突变处女蝇培养瓶屮朵交，25摄氏度培养8天。4.2.4F1代生长情况的观察【8天后】4.2.5F1代性状的观察记录及统计WW+亲代10只

4、白眼，雌XX10只红眼，雄XYW+Wf1只白眼，雄X丫f1只红眼，雌XXww+将亲代果蝇（白眼，雌XX红眼，雄XY）麻醉弃去，观察f1果蝇性状。注意：（1）统计过程屮可以同时进行第二步以节省时间。笫二步是从F1代果蠅屮挑选适合的30只果蝇分成三组分别放在3个饲养瓶杂交培养。（2）每个饲养瓶里应为雌雄对半，并忖应该挑选易于存活的果幌进行杂交并培养。4.3杂交2（伴性遗传的进一步观察）4.3.1杂交用饲养瓶的准备4.3.2杂交亲本的挑选与转瓶+++wmsnwmsn从f1代中收集30对果蝇（雌红眼XX,雄白眼XY）转到3个培养瓶，每瓶

5、10对。八天。4.3.3F2代生长情况的观察4.3.4F2代性状的观察记录及统计【8天后】将亲代果蝇（如何区分亲代与子代？？？大小？？）麻醉弃去，观察f2果蝇性状。这里将连锁与交换性状观察和红白眼的伴性遗传性状观察同时进行表2伴性遗传的观察记录表+W亲代：雌红眼XXW雄白眼XYW只白眼，雄XY+只红眼，xYWW只白眼，雌XX++只红眼，雌XX4.4杂交3（连锁与交换的观察）4.4.1杂交用饲养瓶的准备4.4.2朵交亲木的挑选与转瓶4.4.3F2代生长情况的观察4.4.4F2代性状的观察记录及统计农3连锁与交换观察记录农（不需要记

6、录雌雄）类别基因型表型观察数亲本型+++wmsnXXwmsnXY红眼,长翅,直刚毛白眼，小翅，卷刚毛单交换1单交换2类别基因型双交换合计表型观察数100只左右（随机抽取？）5.实验的结果与分析5.1果蝇的饲养及出现的问题5.2杂交1,基因伴性遗传观察的结果与分析5.3朵交2,基因伴性遗传观察的结杲与分析5.4朵交3,连锁与交换的观察的结果与分析