安捷伦液相色谱Agilent-HPLC操作规程

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1、型号：Agilent1200使用日期：产地：美国责任人：Agilent1200高效液相色谱仪操作步骤：1.开机开机前需更换已过膜并超声脱气好的流动相，依次打开电脑及高效液相色谱仪各电源开关（从上往下），待仪器自检完毕后，打开purge阀，开泵，排空管路气泡，关闭purge阀，双击online图标，进入色谱工作站。2.方法编辑从命令栏“Method”菜单中选择“Newmethod”，出现DEF-LC.M，或者从“Method”菜单中选择“Editentiremethod”，设置方法信息、仪器参数（包括泵、检测器）、数据采集参数等（详见《高效液相

2、色谱仪（Agile1200型）操作规程》），保存方法。3.样品运行调用已编辑好的方法，等待仪器稳定。选择样品运行模式“single”或“sequence”，编辑样品信息，如：存贮路径（path-Subdirectory）、样品名（SampleName）、进样瓶号（Vial）、进样体积等，待online界面左上角红色的“notready”变为绿色“ready”，且压力平稳后，即可进行样品分析。单击START按钮，运行样品。进样结束后，关闭检测器并按要求冲洗色谱柱。4.数据分析数据分析在offline工作站中进行（详见《高效液相色谱仪（Agile

3、1200型）操作规程》）。5.关机色谱柱冲洗结束后，在online界面关闭泵及柱温箱。退出化学工作站及其它窗口，关闭计算机，关闭HPLC系统各电源开关（从下往上）。按有关规定填写仪器使用记录。注意事项：1.流动相使用前必须过滤膜，有机相必须为色谱纯，过0.45微米的有机滤膜；水相必须用Milli-Q水，过0.22微米的水相滤膜，且不能使用超过2天，以防止长菌或者藻类。2.更换流动相时，若发现管路中有气泡，应彻底排除气泡。3.在使用过程中，经常记录压力情况，若发现压力异常，应及时排查问题所在。4.检测完毕后，要及时关闭DAD的灯，以保持灯的寿命

4、。5.如果流动相采用缓冲盐溶液，则检测结束后必须先用90%水和10%甲醇冲洗至少30min（1mL/min），再用90%甲醇和10%水冲洗至少30min（1mL/min）。6.清洗泵头的流动相为10%异丙醇，如果经常使用，须每个月更换一次。21.操作者须将文档保存在D盘下method、sequence和data中相应目录下，可以在它们的目录下建立自己的文件夹，不得任意删除他人的文件。2