萱草愈伤组织芽分化培养基的筛选开题报告

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1、开题报告萱草愈伤组织芽分化培养基的筛选一、选题的背景、意义萱草HemerocallisfulvaL.系百合科(Liliacea)多年生草本植物,以根及根茎入药,为我国传统中药“萱草根(Ra2dixHemerocallis)”,具有清热凉血、利尿通淋的功效,用于治疗水肿、小便不利、淋浊、带下、黄疸、便血、崩漏等症[1-2]。　　又名金针菜,原产我国、日本及欧洲南部。萱草叶狭长,花呈喇叭形,花茎变化大,花形各异,花期从晚春一直到秋季,盛花期可延续几个月。它不仅供人观赏,也可将花蕾作蔬菜供人食用,更是被广泛用于绿化工程,近年来市场对萱草种苗的需求越来越大。从2003年始,我站承担了嘉兴市科

2、技局、海盐县科技局下达的“萱草等宿根花卉的组培苗快繁及产业化开发”等科研课题,对萱草等品种进行了组培快繁试验研究,获得成功,到目前已累计生产了红运、金娃娃等50多万株的萱草,并供应上海、杭州等地,在较短的时间内满足客户的需求。近年来，我国城市环境保护中的绿化建设越来越受到重视，其中急需解决的是绿境植物多样性问题，我国的花卉栽培以前在世界上是有名的，而且花卉品种甚多，但是由于历史原因，国内现有的花卉生产情况与人民生活水平的提高是不相适应的，因此，引进国外优良花卉品种，可以加快解决我国城市绿化中花境植物品种单一的现状。组培法筛选高抗盐植物是现代生物技术之一,利用离体再生系统结合选育新品种

3、具有简便、速度快、准确的特点。近年来研究表明萱草根中含有多种蒽醌类和二氢呋喃-γ-内酰铵类化合物,这些成分具有抗菌、抗癌、杀虫等生物活性[3]。萱草不仅具有药用价值,还具有蔬菜食用和花卉观赏价值。其花经过加工后是颇负盛名的“黄花菜”、“金针菜”,营养丰富,且具有保健益寿之功。萱草组织培养的是基于观赏花卉品种的快速繁殖技术的实验研究[4-6],因此,借鉴这些研究成果,对药用植物萱草开展了组织培养技术方面前期实验工作,期望为进一步研究其药材质以及开发中药功能保健类蔬菜奠定基础。【7】二、最新研究进展近年来,利用植物组织培养技术,成功地获得了许多植物的抗盐培养细胞系,并且选择出了水稻、小麦

4、和冰草等植物的耐盐植株。[8]该试验对大花萱草抗盐愈伤组织的选择试验表明,利用浓度逐级增高的含盐培养基诱导和选择的愈伤组织,在盐份浓度较高的培养基上,无论生长率还是存活率均明显提高。抗盐性大小与在含盐培养基上培养的时间长短有关。愈伤组织的这种抗盐性具一定程度的稳定性。抗盐变异产生的原因可能有两个方面,一是在低水平选择压力下,可能产生了生理适应的细胞;二是在高水平选择压力下经长时间选择培养,可能产生遗传上变异的细胞。这种遗传上发生的变异一般是稳定的,该试验通过大花萱草组培苗的抗性培养基上抗性比较,证明了盐胁迫与繁殖系数、生物产量有一定的相关性,并确定的适合的盐筛选浓度,并确定脯氨酸能反

5、应出组培苗在盐胁迫过程中的生理变化。[9]通过组织培养技术可以快速生产出发育健壮的金娃娃萱草苗。其诱导愈伤组织和形成丛生芽的最佳外植体为花蕾;最佳诱导和继代培养基均为MS+6-BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.5mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L;生根试管苗根系长至1.5cm以上时,移栽成活率高达90.0%以上。【10】自然界的萱草一般采用分蘖等无性繁殖方式进行增殖,但由于其速度慢，一般一株萱草每年仅可繁殖4-5株，因而难以适应市场商品化生产的需求,利用组织培养技术快速繁育试管苗，是一项目前被广泛应用于花卉生产的技术,虽然组织培养技术快速繁殖试

6、管苗存在生产成本高、试管苗出现变异植株等问题，但是采用组织培养繁殖可以提高繁殖倍数，而且可以打破季节局限，加快繁殖速度，实现工厂化育苗,因此，组织培养繁殖技术在挽救濒危稀有植物品种、由于引种植物品种母本植株少而急需扩繁以增加生产规模等方面发挥着巨大作用。前人对于萱草组织培养的研究，仅见有少量简短的报道【11-14】而未见到有关观赏型大花萱草的工厂化扩繁方面的报道,本文就9种观赏型大花萱草外植体的选择和愈伤组织的诱导进行了研究，以期为合作企业提供相关环节的技术参数，为企业进一步大规模组织培养扩繁萱草提供技术指导。【15】三、研究的基本内容通过设计所得的实验方案，确定合适的实验方法。将萱

7、草愈伤组织在选择性培养基上进行增殖，进行目的筛选，保存后进行一系列的筛选，对筛选出来的培养基进行性能鉴定和成分鉴定，确定所选培养基。四、拟采取的研究方法（技术路线）、研究难点及预期达到的目标1技术路线1.1外植体的选择选取以上各萱草品种的叶片（切成2×3cm大小）、茎尖、根（侧根切成2±0.5cm长，主根横切为半径1±0.5cm的园片）和子房（横切为3段），经流水冲洗，70%乙醇浸2-3遍后，蒸馏水冲洗2-3次，再用0.1%HgCl2灭菌8-10mins，