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1、,以上表明产生菌的固体发酵产物,,讯。,人,。,具有某些生理活性文献报道液体培养法中毖以让枷十加劝的合成培养基和光质控制可促进朋的产详,生。本法的发酵周期虽比液体培养略长些,但,,讨以比,其产物的效用则与液体培养方法相同因而。砂梦也可以用于研究的生理功能出,出,们,祖滋一义,参考文献,,组五视己吴少伯,赵毓桔一节氨基嗦岭和脱落酸对离体叶片过司叩时饰妙以斗氧化物酶同工酶的影响植物生理学通讥,“少如,,对召应逆版期昊少伯载体蛋白结合的数目测定植物生理学通植物叮了仇”左扣应汉,生理学通讯肠笋嫩恻肠洲一植物体内微量多胺的分离和测定,韦军江苏农学院园艺系扬州,,王习已,厂哟娜咖咧
2、可刀分饭左脚滋山嘟见滩尹应破脚砚凸蔽,,州阴目前对植物组织内多胺的含量主要是将器皿内壁涂上一层,在。℃下烘梨声。植物材料的直接提取液和苯甲酞氯或和丹磺彻秘,,“二果实由市场购得酸氯反应后,利用高效液相色谱仪测定川。此多胺的抽提、,方法在测定多胺含量较高的胚芽和幼果时取梨果肉加入冷,‘,,尚可但对含量较少的材料如开花后一个月溶液后匀浆在冰浴中静置再,。℃下以离心,的果实则无法测定本文采用阳离子交换树在一抽提。脂来分离和浓缩多胺对和闭液置于一℃下保存待用,离子交换柱的方法作了改进用以测定梨果实中微量的的制备和预处理,,。,多胺减少了干扰提高了灵敏度称取树脂用以制作离子交换柱
3、玻璃管尺寸为,并进行预处材料与方法,理过柱顺序为溶液化学试剂和植物材料蒸馏水溶液丁二胺、亚精胺、精胺的氯化物、阳离子蒸馏水溶液,一交换树脂和微孔过滤柱,一一为公司产品苯甲酸氯为日本和光纯收稿药化学工业株式会社产品。使用的玻璃器皿致谢此项工作在日本鸟取大学园艺学研究室进行得到,。田边贤二教授的支持和帮助全部经硅化处理用溶液将玻璃溶液、释倍,再将此浓度为’勺溶液溶液蒸馏多胺标准液通过阳离子交换柱和减压蒸馏后。水。的测定结果从表中可见方式的灵敏,,多胺抽提液的浓缩度很高因为方式无法检测浓度只有。整个过程流速为,过柱顺序为即的多胺标准液尽管两种测定方式所测一标准液或果实抽提液多
4、胺标准液的浓度相差倍,但由于阳离,蒸馏水一一溶液以子交换和减压蒸馏过程对多胺的浓缩效应,。一溶液配制一两种测定方式的峰高差异并不大两种方。,溶液溶液式测得的多胺绝对含量虽然相同但方式得到的洗脱液留待测定。所测峰的高度要比方式降低左右这多胺的测定显然是多胺在阳离子交换和减压蒸馏过程中将的损失所造成。这种损失可提高多胺测定的上述洗脱液倒入烧瓶中在,。,。而且下减压浓缩至干燥加入写灵敏度也是值得的的差异属系溶液充分洗涤烧瓶后,移入离心管中,再向离统误差,可以校正。故方式测定结果的精度。以并不受影响心管内加入溶液和,,苯甲酞氯天旋涡振荡在常温,一表两下静置然后加入饱和溶种不同方
5、式测定多胺液和,,标准液终高的比较乙醚再以离心抽,取而上清液放入试样瓶内在真空冷冻机蜂高方式方式一乃,夕污,日,中吓燥加入甲醉充分洗涤试样瓶再一将,洗涤液通过微孔过滤柱将此过滤液放弓,以,弃再用蒸馏水重新通过微孔过滤柱冈过滤液留待测定。高效液相色谱仪测定条件假设测骏方法成对比较假设测验。分光检测器为日立一型,泵为日一立型分离柱为日立逆相阳离子交换过程减少多胺测定中其它成,。、,分离柱义理论段分干扰的原因,‘,数为保持能为峰对称值阳离子交换树脂只能吸附抽提液的阳离,一,,。,为流动相为甲醇水柱温子不能吸附阴离子和中性物质因此在抽℃,林,,,流速为而测定波长为提液通过交换柱
6、后其中的阴离子和中性物,。、、、灵敏度为进样量川质如有机酸各种糖类蛋白质中性和酸性氨基酸等都不能与阳离子交换树脂的离子结果与讨论,。交换很快就流出交换柱此时吸附在交换树阳离子交换和减压浓缩过程对多胺测定脂上的阳离子有多胺、碱性氨基酸、金属离子灵敏度的影响和其它一些带正电荷的有机分子。在这些阳,以,表是用多胺标准液两种不离子成分中因多胺一般具有两个或两个以。,同方式测定的组峰高的平均数的比较方上的氨基是一种能够强烈电离的有机小分式为多胺标准液的直接测定子,因此,它与阳离子交换树脂的亲合力最,结果方式为将多胺标准液稀强即最容易牢固地吸附在阳离子交换树脂··。产。七本文中用磷
7、酸缓冲液和川盐酸溶择吸附效率下降抽提液应经过离子交换,,,、液通过交换柱的目的就是先将与阳离子交换柱后才能进行减压浓缩否则大量的糖类,树脂亲合力较弱的阳离子逐步洗脱下来这,氨基酸和其它杂质就会和多胺混在一起其时吸附在交换树脂上的阳离子主要是多胺类中有,些杂质也含有氨基易对多胺的苯甲酞。,。,、物质在实验中发现多胺与阳离子交换树脂化反应造成干扰此外有些植物材料中糖,以,,的亲合力极强至于的盐酸溶液有机酸等杂质含量很高极易污染色谱柱以。。也不能将多胺完全置换出来只有川毛致柱的使用寿命缩短而且这些杂质的保留。,的盐酸溶液才能将多胺完全洗脱下来本
