实验2分离以尿素为氮源的微生物.pptx

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1、实验二分离以尿素为氮源的微生物衢州二中　范苗浙科版高中生物选修一《生物技术实践》实验背景一分离以尿素为氮源的微生物尿素（脲）是蛋白质降解的产物。人和其他哺乳动物的尿中都含有尿素，但它不能直接被农作物吸收，大量的尿素存在会对会对环境造成污染。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，通过分解尿素作为其生长的氮源。(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2脲酶实验目的二分离以尿素为氮源的微生物使用专一的培养基（含有尿素）分离并鉴定有脲酶的细菌实验原理三分离以尿素为氮源的微生物原理：(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2脲酶NH3使培养基的pH升高

2、，遇酚红呈红色设计方案四分离以尿素为氮源的微生物2、要分离以尿素为氮源的微生物，培养基如何选择？如何设计对照实验？设计实验还要遵循什么原则？实验组：尿素固体培养基对照组：全营养LB固体培养基3、尿素如何灭菌？为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？酚红的作用？作为指示剂，NH3使培养基的pH升高，遇酚红呈红色；4、本实验中用什么方法分离细菌？稀释涂布分离法G6玻璃漏斗过滤；重复性原则。琼脂未被纯化，有含氮化合物。1、土样从哪里获取？有哺乳动物排泄物的地方取得。实施方案五分离以尿素为氮源的微生物1、制备培养基全营养LB固体培养基尿素固体培

3、养基灭菌倒平板LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒平板(G6玻璃砂漏斗过滤尿素)2、制备细菌悬液3、用涂布分离法分离细菌4、将培养皿倒置培养。注意：取样时，尽量只取悬液。10-3、10-4、10-5、10-6各做三个培养皿37℃恒温培养24-48h5、观察。结果分析与讨论六分离以尿素为氮源的微生物2、与LB全营养培养基菌落数相比，尿素培养基上为什么只有少量菌落？能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量。1、说出涂布分离时的注意事项？3、尿素培养基就是选择培养基，为什么还要加入酚红鉴别尿素分解菌呢？尿素分解菌能将尿素分解成氨，氨就可能成为

4、其他微生物氮源（如硝化细菌）。培养基上可能出现以氨为氮源的微生物，故要用酚红培养基鉴别微生物种类4、在课后写出分离和培养石油分解菌的实验方案稀释度10-2稀释度10-3稀释度10-4尿素固体培养基LB固体培养基谢谢！