菊花的组织培养.ppt

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1、菊花的组织培养指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称:植物离体培养一、植物组织培养的概念概念:细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质植物组织培养原理:植物细胞的全能性什么叫分化?其实质是什么?什么叫脱(去)分化、再分化?愈伤组织的细胞有什么特点?如何控制细胞的脱分化与去分化?·阅读32页解决下列问题:二、植物组织培养的基本过程基因的选择性

2、表达二、植物组织培养的基本过程愈伤组织三、影响植物组织培养的因素:1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等未开花植物的茎上部新萌生的侧枝3、不同植物激素使用顺序使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素有利于细胞分裂但不分化先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高4、

3、不同植物激素使用量生长素/细胞分裂素比值结果比值高时促根分化,抑芽形成比值低时促芽分化,抑根形成比值适中促进愈伤组织生长思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题?生长素/细胞分裂素高利于根和愈伤组织的形成适中利于根芽的分化5、pH、温度、光照(菊花组培)pH=5.8温度控制在18—22℃每日光照12h6、消毒在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培四、实验操作移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培养基灭毒1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)2、外植

4、体的消毒(酒精、氯化汞)3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧)4、无菌箱中的培养;5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?结果分析与评价(一)对接种操作中污染情况的分析(二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化(三)是否进行了统计、对照与记录(四)生根苗的移栽是否合格菊花的组织培养再分化材料性质、营养物质、调节物质、环境条件外植体的消毒接种基本原理:细胞的全能性基本过程:脱分化愈伤组织影响因素:操作流程:配制MS固体培养基培养移栽栽培

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