菊花组织培养.ppt

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1、《菊花的组织培养》植物的组织培养是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。组织培养:思考(一).植物组织培养的基本过程一、基础知识1.植物体在个体发育过程中将形成不同的细胞和组织原因是?细胞分化2.植物组织培养的原理是什么?植物细胞具有全能性1.细胞的分化①概念:在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程.②特点:③原因:持久性、稳定性、全能性基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果.2.细胞的全能性①定义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性.②原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的

2、全套遗传物质(全套基因)10个14200多种生物体的每一个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质(全套基因)基因的选择性表达植物组织培养的基本过程是怎样的?离体的植物组织或细胞(外植体)脱分化愈伤组织再分化胚状体(根、芽)植物体外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官.脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的疏松而无规则的,高度液泡化的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞2-3周,愈伤组织开始形成。再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根和芽等器官的过程。3-5周之后,诱导出的新叶片和芽。(二)影响植

3、物组织培养的因素1、外植体的选取△不同植物的组织培养难度___________△同一种植物的不同组织培养难度_________差别很大不同如菊花的组织培养,一般选择_________植株茎__________________。未开花上部新萌生的侧枝对于同一种植物材料,材料的_________、__________________等也会影响实验结果。年龄保存时间的长短阅读教材,思考影响植物组织培养的因素有哪些?2、培养基的配制常用的一种培养基为___________其主要成分包括::C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co________:甘氨酸、烟酸、

4、肌醇、维生素、蔗糖等_________:生长素、细胞分裂素、赤霉素等MS培养基大量元素微量元素有机物植物激素使用顺序实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于______,但_________先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用___________提高3、不同植物激素使用顺序和使用量①不同植物激素使用顺序细胞分裂细胞不分化分化频率②不同植物激素使用量生长素用量比细胞分裂素用量植物细胞的发育方向比值高时有利于根的分化、抑制芽的形成比值低时有利于芽的分化、抑制根的形成比值适中时促进愈伤组织的生长4、环境因素:不同的植物对各种条件的要求往往不同。如进行菊花的组织培养,一般将pH

5、控制在__________左右;温度控制在__________;并且每天用日光灯照射_____。5.818~22℃12h5、消毒在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境。1、实验操作流程制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培移栽二、实验操作2、实验具体操作(1).制备MS固体培养基实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备①配制各种母液配制母液时,大量元素浓缩__________,微量元素浓缩__________。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。1mg/

6、ml410倍100倍②配制培养基。按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液,配制MS培养基。植物激素在菊花组织培养中,可以不添加_________________,原因是菊花茎段组织培养___________________。比较容易③灭菌将分装好的培养基连同其他器械一起进行_________________。高压蒸汽灭菌此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物体的光能自养。高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?思考?(2).外植体消毒①选取菊花茎段时,要取________________。流水冲洗酒精无菌水氯化汞无

7、菌水②消毒流程:浓度______摇动_____次时间_____s浓度______时间_____min至少清洗___次漂净_______生长旺盛的嫩枝70%2~36~70.1%1~23消毒水外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。思考?在选取菊花茎段的时候,为什么要选取生长旺盛的嫩枝?不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到消毒效果,又要考

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