大鼠心梗模型 good.ppt

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1、大鼠心梗模型沿左侧胸骨旁斜行切口,上界为两前肢后缘连线,下界为第5肋间,依次切开皮肤、浅筋膜和深筋膜,并用止血钳钝性分离胸大肌和前锯肌交界处,在靠胸骨缘处用止血钳钝性分离第3、4肋间进胸,用专用开胸器撑开3、4肋间暴露心脏,将棉纱放置在肺组织旁边,防止损伤肺组织。,潮气量约3ml/100g,频率为70次/min待大鼠出现吞咽动作时,拔除气管插管。术毕肌肉注射青霉素10活体取出心脏,迅速取材,去除左、右心房及右心室,冲洗后4%多聚甲醛溶液固定,沿左室长轴由心尖至心底做厚切片,将左室分为6片,石蜡包埋切片用6一OProlene线缝针在距左心耳下缘1mm处,

2、左冠状静脉主干附近的室间沟内,将LAD连同少量心肌组织一起缝扎,进针深度控制在1~2mm,宽度为2~3mm关胸过程中于切口内放置排气管(用小儿头皮针的软管自制),关胸毕,抽空胸腔积气后拨除。试停呼吸机,大鼠恢复自主呼吸后,拨出气管插管,充分清除气管内分泌物。根据文献[l”一]和本实验室条件建立模型:健康成年雄性sD大鼠,体重200一2509,术前禁食12h,不禁饮。3%戊巴比妥钠30m叭g腹腔注射麻醉大鼠,起效后仰卧位固定于鼠板。用0号婴儿喉镜片经口气管插管,插入16G静脉留置针,接小动物呼吸机控制呼吸。确定插管位置深度正确后,口角挂线固定导管,根据血

3、气结果,呼吸参数设定为潮气量4一6ml,频率60一70次/分,吸呼比1:1。备皮,消毒,铺单后,在左侧腋下和剑突连线偏上Icm做一斜切口,长度约为2.scm,以心脏搏动最强点为中心。依次钝性分离深浅筋膜、胸大肌、前锯肌,显露肋骨,可见心脏暗影。将皮肤与各层肌肉做一个荷包缝合备用。充分止血后,由第3、4肋间入胸(心搏最强点偏上一肋),钝性分离肋间肌,分离肋间肌范围应适当,不能太接近胸骨以免造成大出血。开胸一定要钝性分离从心跳最明显处开胸没有什么大血管,一些小的血管可以把组织先用止血钳夹一下再剪开,那样不会出血。呼吸机→浅麻醉→右侧卧位→胀肺引流管→缝合肋

4、间→对合胸大肌与前锯肌→缝合皮肤→抽吸胸腔积气、积液→拔除引流管→碘附消毒术野,对合肌肉及皮下1.用套管针气管插管的话,消毒后剪开皮肤,钝性分离皮下组织及肌肉暴露气管,插套管针,只会留下一个针眼,术后缝合皮肤就行了,不会有什么危险,你的问题可能出在大鼠自主呼吸还不平稳就拔管缝合了,这时候大鼠会窒息死亡。2.开胸一定要钝性分离从心跳最明显处开胸没有什么大血管,一些小的血管可以把组织先用止血钳夹一下再剪开,那样不会出血。3.心脏挤出后用棉签翻过来就看到很明显的一条血管,是冠状静脉前降支,考下还有一条旋支。前降支起始处就在肺动脉圆锥和左心耳之间,具体结扎的高

5、低还要看你需要的心梗面积是多大,自己要摸索。左心室的壁还是很厚的,差不多有2~3毫米,你可以解剖一只大鼠看看,我用的就是普通持针器,进针深度尽可能深一点吧,〉1毫米。4.关胸的时候捏一下胸部排气就行了,也有人说拿针管抽气,但我觉得这种方法力度不好掌握。5.没有二次开胸过,请其他高人给你指点吧。 祝你早日成功动物的选则:健康雄性SD大鼠,建议使用250g左右体重的,耐受力强。而且小一点的胸壁较薄,开胸容易。麻醉:我用的是10%水合氯醛,感觉效果还不错,20分钟左右待大鼠呼吸平稳即可手术,2~3个小时后苏醒。剂量0.4~0.45ml/100g体重,这个也有

6、个体差异,要大家自己摸索一下。 这里给大家一些建议:1.麻药刚发挥作用的时候大鼠状态不平稳,这时候不要急于作手术,多观察一会儿。2.麻醉程度宜浅不易深,如果麻药打浅了,只要大鼠没有过分挣扎,可适当局麻,千万不可反复补麻药,我的经验这样的情况即使手术成功大鼠也活不长。关于呼吸:这是关系到手术成功与否的最主要因素。麻醉药会使大鼠呼吸道产生分泌物,我一般都是在麻醉大鼠后腹腔注射阿托品0.1mg/只,但据我观察我们学校动物中心的大鼠分泌物不多,不用药也行,曾经买过河南一批大鼠,分泌物极多,必须用药。 气管插管我用的是临床上的静脉输液套管针,创伤小,目前术后没发

7、生过呼吸道感染情况。关于呼吸机:我也用过江西特力公司的小动物呼吸机,但发现不太适用于大鼠这样的小动物,潮气量的调节非常粗略,不好控制。现在我用的是我们学校自己生产的呼吸机,其实就是一个简易的空气泵,我自己又改装了一下,现在是医用氧和空气的混合气,呼吸频率60/分钟,潮气量3ml/100g。这里由于条件限制,所以潮气量是比较粗略的,而且氧气含量也无法测量,但是据我的经验,给纯氧对大鼠的损伤比不上呼吸机还大,只要有呼吸肌支持,适当给些氧气辅助一下,大鼠成活不成问题。关于手术切口:我是在胸壁正中剪开皮肤,然后在胸骨左侧1CM左右钝性分离皮下组织和肌肉,最后用

8、血管钳撑开胸腔,助手用自制小拉钩拉开胸壁。这样的好处是每一层的开口不在一个位置,关胸后胸腔自然

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