观察细胞中DNA和RNA的分布.ppt

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时间:2020-01-31

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1、实验三观察DNA和RNA在细胞中的分布原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。Unna染色法:Unna染色法:1899年Pappenheim首创了甲基绿-哌洛宁(mehtyl-green-pyronim)染色法。1902年Unna对这一方法进行了

2、改良。1940年Brachet研究证明用甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果。碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后,由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同,而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。DNA被甲基绿染成绿色,RNA被哌洛宁染成红色,这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来。实验目的1、学会准备本实验。2、练习并熟练掌握本实验操作过程。3、学会指导学生实验。[课前准备]1、实验材料用具:人的口腔上皮细胞或蚕豆叶表皮,洋葱表皮大烧杯,小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片

3、,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜2、质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为0.8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂(取A液20mL,B液80mL配成染色剂,使用时现配。A液:取吡罗红甲基绿粉1g,加入100mL蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用。B液:取乙酸钠16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL。取稀释的乙酸钠溶液30mL和乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为4.8的溶液),蒸馏水。Unna试剂甲液5%派洛宁水溶液,6ml2%的甲基绿水

4、溶液,6ml蒸馏水,16ml乙液,1mol/L乙酸钠,16ml用时混合。乙液,1mol/L乙酸钠,A、取乙酸6mL---100mLB、乙酸钠13.5g---100mLA40mL+B60ml即可。学生预习实验。学生预习实验。(一)老师介绍实验的原理以及科学认识的模式原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时

5、使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。科学认识模式是“假设检验”,即在提出问题后,接着提出猜测性的假设,然后用观察和实验来检验。这种科学认识模式的程序是问题→试探性假设→批判与检验。这是科学探究的一般程序,也是探究性学习的一般程序。(二)找一个预习作业做得比较好的同学,(二)找一个预习作业做得比较好的同学,陈述实验如何进行A.问题的提出:DNA和RNA在细胞中是怎么分布的?B.试探性假设:DNA分布在细胞核,RNA分布在细胞质。C.实验检验:甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RN

6、A呈现红色,通过观察两种颜色出现的部位来判断DNA和RNA在细胞中的分布。实验方法步骤1.取口腔上皮细胞(1)在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。(2)用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片的液滴中涂抹几下。(3)点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。2.水解(1)在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。(2)在大烧杯中加入30℃温水。(1)用吸水纸吸去载玻片上的水分。(2)将吡罗红甲基绿染色剂

7、滴2滴在载玻片上,染色5min。(3)吸去多余染色剂,盖上盖玻片。5.观察①低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;②高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。洋葱表皮细胞结论:通过各种动植物实验材料的观察,同学们观察到的结果非常相似,在细胞核部分被染成了绿色,而在细胞质部分被染成了红色。说明DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。注意事项1.材料的选择①选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;②常用的观察材料由人的口腔上皮

8、细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点①取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质;②取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。4.安全要点①用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂;②烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调

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