脂多糖干预对大鼠周围神经损伤后瓦勒变性的影响.pdf

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时间:2020-02-28

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1、2017年4月中国实验动物学报April2017第25卷第2期ACTALABORATORIUMANIMALISSCIENTIASINICAVol.25No.2殝檵檵檵檵殝檵檵殝研究报告檵檵檵檵殝脂多糖干预对大鼠周围神经损伤后瓦勒变性的影响12111111*熊乐,张倩,沈若武,边洪琳,孙广强,王毅,张凤玉,张蓓(1.青岛大学基础医学院,山东青岛266071;2.青岛阜外心血管病医院,山东青岛266034)【摘要】目的探讨脂多糖对于大鼠坐骨神经损伤瓦勒变性早期髓鞘碎片清除的影响。方法将50只Wistar大鼠随机分成假手术组(10只),模型组(20只)

2、和脂多糖LPS组(20只),LPS组及模型组横断大鼠右侧坐骨神经后,行神经外膜端端吻合;假手术组仅游离出坐骨神经,然后关闭切口。LPS组大鼠在神经断端显微注射LPS(2g/L)1μL,模型组及假手术组大鼠注射同等体积生理盐水。于术后1.5、24h和7d取术侧坐骨神经。实时定量PCR(qRT-PCR)检测坐骨神经中白介素1β(IL-1β)mRNA、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA水平;免疫+荧光法检测坐骨神经中CD68巨噬细胞的表达;HE染色观察坐骨神经的病理变化;油红O染色观察坐骨神经脱髓鞘程度;LFB染色观察坐骨神经髓鞘变化;坐骨神经

3、功能指数(SFI)评价大鼠运动功能的恢复情况。结果实时定量PCR显示,与假手术组相比,术后1.5h模型组IL-1βmRNA和MCP-1mRNA的表达均明显升高(P<0.001,P<0.001),与模型组相比,术后1.5hLPS组IL-1βmRNA和MCP-1mRNA的表达明显升高(P<0.001,P<0.001)。术后24h模型组IL-1βmRNA和MCP-1mRNA的表达均明显升高(P<0.001,P<0.001),与模型组相比,术后24hLPS组IL-1βmRNA和MCP-1mRNA的表达明显升高(P<0.01,P<0.01)。免疫荧光可见,

4、与模型组相比,术后+7dLPS组中CD68细胞表达显著上调(P<0.05)。术后7d坐骨神经HE染色可见,LPS组坐骨神经断端较多炎性细胞浸润,许旺细胞增殖活跃,模型组神经断端炎性细胞和许旺细胞较少。术后7d坐骨神经ORO染色可见,与模型组相比,LPS组断端远侧脱髓鞘程度较高。术后7d坐骨神经LFB染色可见,模型组和LPS组坐骨神经断端均出现脱髓鞘反应,但与模型组相比,LPS组神经断端残余髓鞘碎片明显减少(P<0.05)。SFI显示,与模型组相比,LPS组大鼠在术后10、20、30、40和50d分别不同程度升高,术后20d明显增高,差异有显著性(

5、P<0.05)。结论脂多糖通过激活固有免疫系统加快大鼠坐骨周围神经损伤后瓦勒变性早期髓鞘碎片的清除。【关键词】周围神经;瓦勒变性;脂多糖;髓鞘碎片【中图分类号】Q95-33【文献标识码】A【文章编号】1005-4847(2017)02-0211-07Doi:10.3969/j.issn.1005-4847.2017.02.018EffectoflipopolysaccharideonWalleriandegenerationafterperipheralnerveinjuryinrats121111XIONGLe,ZHANGQian,SHENRu

6、o-wu,BIANHong-lin,SUNGuang-qiang,WANGYi,11*ZHANGFeng-yu,ZHANGBei(1.MedicalCollege,QingdaoUniversity,Qingdao266071,China;2.QingdaoFuWaiCardiovascularHospital,Qingdao266034)【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsoflipopolysaccharide(LPS)onmyelinphagocytosisduringWal-leriande

7、generationafterearlyperipheralnerveinjuryinrats.MethodsFiftymaleWistarratswererecruitedandrandom-lydividedintoLPSgroup(n=20),modelgroup(n=20)andshamgroup(n=10).TherightsciaticnervesofratsintheLPSandmodelgroupswerecutandsuturedend-to-end,whilethesciaticnerveofshamgroupratswere

8、onlyexposed.Immediatelyaftersurgery,theratsinLPSgroupweregivenmicroi

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