专题一 微生物的培养与应用 讲义.doc

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1、专题一微生物的培养与应用微生物的分离和培养(II)°2.某种微生物数量的测定(I)。3.培养基对微生物的选择作用(TT)o4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用(II)o专题知识检测1.培养基(1)培养基一般含有丞、噬遞、氮源和无机盐。(2)培养基按物理状态分为固佐培养基、半固体培养基和液体培养基;按功能分为选择培养基和鉴别培养基。2.常见的两种接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。3.三种常用的灭菌方法(1)灼烧灭菌，如接种环、接种针。(2)T•热灭菌，如玻璃器皿和金属用具等°(3)高压蒸汽灭菌，如培养基等。4.土壤

2、中分解尿素的细菌的分离与计数过程土壤取样一样品稀释一将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养慕上一筛选能生长的微生物菌落。5.分解纤维素的微生物分离的实验原理纤维素分解菌6.微生物计数的“2”种方法(1)直接计数法:需用血细胞计数板借助显微镜观察,实验结果偏大。(2)间接计数法：稀释涂布平板法,计数结果偏尘。7.菌种的保存方法(1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保存的方法。(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。1.消毒和灭菌的比较项目条件消毒灭菌核心考点突破考点微生物的培养、分离与计数结果较为温和的物理或化学方法强烈的理化因素

3、常用方法应用范围煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦试双手,用氯气对水源进行消毒等灼烧灭菌法如工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具等高压蒸汽灭菌法培养基及容益的灭菌杀死物体内外所有的微生物，包括芽抱和抱子仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物2.平板划线法每次灼烧的日的第一次操作每次划线之前划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少杀死接种环上残留的菌种.避免细菌污染环境和感染操作者3.纯化微生物的接种方法项目平板划线法

4、稀释涂布平板法原理通过接种环在琼脂固体培养基表连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表养基的表面在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落面9进行培养。在稀释度足够高的菌液里9集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单项目平板划线法稀释涂布平板法优点可以观察菌落特征，对混合菌进行分离可以计数，可以观察菌落特征缺点7不能计数吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延个的菌落4.选择培养基与鉴别培养基的比较

5、种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉困培养基中加入某种指示剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物伊红美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌丿高频题型o»题型一微生物的实验室培养及无菌操作技术1.在实验室培养微生物，一方而需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方而需要确保无处不在的其他微生物无法混入。请回答下列相关问题：(1)培养基能

6、为培养的微生物提供营养。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有、、、;另外，培养基还需要满足微生物生长对、、的要求。(2)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。对实验操作的空间、操作者的衣着和手，需进行清洁和(填“消毒”和“灭菌”)；对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需进行(填“消毒”和“灭菌”)。(3)微生物接种的方法很多，其核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。微生物接种最常用的方法是和O(4)对分离的微生物作进一步的鉴定，常需要借助生物化学的方法。如在以为唯一氮源的培养基中加入,可用来鉴定分解尿素的细菌；在以为唯一碳

7、源的培养基中加入，可用来鉴定纤维索分解菌。答案(1)水碳源氮源无机盐pH特殊营养物质氧气(2)消毒灭菌(3)平板划线法稀释涂布平板法（4）尿素酚红指示剂纤维素刚果红解析（1）各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，对实验操作的空间、操作者的衣着和手，需进行清洁和消毒，对用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等需进行灭菌。（3）常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。（4）微生物的鉴定常用鉴别培养基，在以尿素为唯一氮源的培养基中加

8、入酚红指示剂，观察是否变红，可用来鉴定分解尿素的细菌；在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红，观察是否有透明圈产生，可用来鉴沱纤维素分解菌。1.2016年7月郑州市卫生计生委发