禽致病性大肠杆菌aroA和luxS双缺失株的构建及其菌蜕疫苗的制备.pdf

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2、Ｃ，－■＊＝＊‘■＊＝＊－、？、＇－Ｓ杨立罕三八？．《’－這指导教）－！币，扬；李金贵教授州大学，江苏扬州，２巧００９＾：＿：＿＇—上海兽于圣青研究员，中国农业科学院，医研究所，上海，２００２４１４’＼、韩先干研究员．中国农业科学隐．上海兽医研究所．上海．２００２４１＾、若、／申谐学位级別：硕１｜＿少；临床兽医壬学科专１称ｉ？＾论文提交。期：２０１６年５月论文答辩Ｕ期：２０１６年６月马护中‘－学位授予单位；扬；畐６＿＿．叫＾

3、？對立授予日期午巧！…—／＾答辩委员会主席：陶建平教授．Ｖ＾＾？一＾．或雜－＾－：＾接之、一＊？？＞於．＿、、二？－户乂－火戶一＊一‘．；．．－遥＾麵＾．％一—一．．’２０化６—心－年５＇月‘＇＇？采少篇年冰琴ｆ至二心心［，巧《术、－．－Ｖ哪：歇；＾裴ｙ＇－＇去＾Ｖ．马：人户Ｘ；声气户，．吟成禽致病性大肠杆菌和／ｗ议双缺失株的构建及其菌魄疫苗的制备Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄｂａｃｔｅｒｉａｌｈｏｓｔｓｄｅｖｅｌｏ

4、ｐｍｅｎｔｏｆＡｖｉａｎｇｓｃｈｅｒｃｈａｃｏａｒｏＡ－ｕｘＳｏｕｂａｔｈｏｅｎｉｃＥｉｉｌｉｌｄｌｅｅｎｅｄｅｌｅｔｉｏｎｐｇｇｍｕｔａｎｔ研究生；杨立军导师：李金贵教授于圣青研究员韩先干研究员扬州大学兽医学院２０１６年６月舍致病化大肋抒菌和／ｍｘＳ双缺失株的构建及其菌晚疫苗的制备Ｉ禽致病性大肠杆菌和＊双缺失株的构建／ｗｘＳ及其菌蚁疫苗的制备中文摘要禽大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌（ＡｖｉａｎＰａｔｈｏｇｅｎｉｃＣ０化ＡＰＥ

5、Ｃ）引起的，Ｗ气囊炎、肝周炎和也包炎为主要特征禽类急性，是养禽业常见的、慢性传染病的总称传染病。目前该病的防控主要通过抗生素治疗及疫苗免疫，但抗生素滥用导致的耐药和药残问题，严重威胁养禽业的健康发展和公共卫生安全，；而传统疫苗由于禽大肠杆菌的血清型较多，不能对该病提供有效防控，亟需开展新型疫苗的研制ａｃｔｅｒｉａｌｈｏｓｔ，ｓ）。菌晚（ＢｇＢＧ是通过调控唆菌体裂解基因Ｅ在革兰氏阴性菌中表达而形成无细胞质及细胞器的细菌空一，壳是种关于疫苗、药物及呈递系统的新技术。与传统疫苗

6、相比，菌蚁疫苗具有制备简单、使用安全、运输方便等优点。本研究通过构建禽致病性大肠杆菌ＤＥ１７（０２血清型及／Ｍ说双缺失疫苗株，并开展菌蚁疫苗的研制及免疫效果评价，Ｗ期为禽大肠杆菌病的防控提供参考。１）禽致病性大賜杆菌流行病学调查２０１５年，自江苏、安徽、福建等省部分养殖场分离、鉴定１３９株大肠杆菌，其中从病禽中分离到２０株ＡＰＥＣ。血清型检测结果表明，〇血清型（１１株）、化血清型（１４）１株和〇７８血清型（１４株）占分离菌株总数的２８％，ＡＰＥＣ总数的５０％。表明０｜、〇２、

7、〇７８血清型仍然为ＡＰＥＣ的优势血清型。）参照美国临床和实验室标准化研充所（ＣＬＳＩ制定的抗菌药物敏感性试验执行标准，选取１４种抗菌药对分离菌株进行耐药性检测，结果表明，９９％Ｗ上分离菌株对红霉素、克林霉素和利福平耐受，１０，５７．３％的１３。此外％％的分离菌株对种Ｗ上抗生素耐受菌株对种药物都耐受。＇对分离菌株的毒力基因检测结果表明：／ｗｃＺ）（８２％），ｂＡ（５８．６％），ｍ（５５％）和／咕〇（４４．６％）（．（（．有较高的分布率，而ｃｒａ／ＣＴ／１９３％），化化

8、４１４．３％），ｐａｐｃ４．３％）和Ｖ如（６７／。）＇２０％。Ｗ）＞２ＰＥＣ的，奉力基因分布率均低于表明山、？、／ＭｃＺ和崎为Ａ保守基因推测其可能在ＡＰＥＣ致病过程中发挥重要作用。２）ＤＥ１７ｚｌｗ〇ｙ４和ＤＥ１７Ｚ／ＷＯ心心Ｓ的构建及生物学特性硏究，ＤＥ１７ｗｏｙｉ（ＤＥｚｌｗ〇４ＤＥ１７／ｕＳ本研究通过同源重组技术构建了缺失株１７ｖ）和ｘｕ扬州大学硕去学位论义双缺失株（ＤＥ１７Ｊｗｏ＾Ｊ／？ｘ５