烟草中Ntpx基因的克隆及表达特性研究.pdf

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1、,-.rKI孽聋夢/l沪寶:,補.班皆濟f"v甲蒙¥養或.、‘药戶.參‘省;C管'*';、巧H."./.袭/.:-興/是.墓;...i.’.:轉狂載^‘..弓‘,>;."/r;^.N,擇..,-J..vv-NV?i"‘f秦W南xv^^f、每U’"..苗慕‘為::..*n夸巧-r.V>学位I论文穿’、却.;/韦v'為滅梦闕.wV?.赏中吹細觀陸及!达特細脫V0';?.皆.v.:''/奏V/:.".,巧::.I.t\.、,若‘一':、;%、,

2、>貧.窗-.V ̄巧誦.,r^r起‘勢’-.究^.罗秀占v-:、'.田云^授.巧V/.';..、卢向授sv...怯.生說学L苗錦.沪!..'J:心分t!I声;/....:1'-:Xf古1技、^妄一^某共-^我碱^身-?:益琴/.'e/0多巧.3"^片霉>/*v巧./v.‘禱:.\:^,.藝.;少分年敎T¥-&v;/-气::.:子.'..>..:背#//.;;复、.、普V辜.度誤、分类号S199密级公开UDC

3、单位代码10537蝴斋农史丈緣硕:t学位论文烟草中7V醉C基因的克隆及表达特性研究StudiesonCloningandExpressionCharacterizationofNtPxinTobacco研究生姓名罗秀云指导教1币田云教授|副指导教师卢向阳教授学位类型硕:t学科领域生物化学与分子生物学研巧方向分子生物学论文答辩日期20-06-09答辩委员会主席當孟良15论文评阅人刘选明刘文彬黎继烈二〇—五年六

4、月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,论,除了文中特别加W标注和致谢的地方外文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。:<^研究生签名:时间>么年口月^曰喪乏^关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定,目P:学校有权保留、

5、送交论文的复印件和电子稿,允许论文被查阅和借阅,可W采用影印缩印或扫描等、复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可(^用不同方式在不同媒体上发表传播学位论文的全部或部分内容,并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究生教育。保密的学位论文在解密后应遵守此协议)(研巧生签名:时间:年b/月曰fii如麥/占,导师签名::时间月/日//^摘要摘要植物由于受到外界环境胁迫的刺激,导致机体产生氧化胁迫,从而影响植物的生理生化特性和代谢途径。过氧化物酶(

6、Px)在植物胁迫应答、防御反应和生长发育过程中具有重要的作用。本论文W烟草为材料,从中克隆得到编码过氧化物酶基因的新。成员7V脚C,并对其性质做了初步分析本论文获得如下主要研究结果:(1)从烟草中克隆得到编码过氧化物酶基因的新成员Mpx,其开放阅读框长990一-b,eoxidase4结构域。p,能够编码329个氨基酸残基具有个典型的pr(2)Mpx在成熟烟草植株各器官的表达水平从高到低依次为花、茎、叶和根。(3)Mpjc基因的表达不仅受到低温、ABA、MeJA、GA的显著诱导

7、;也受到高温、SA的较显著诱导,受到ET、干旱诱导调控不显著;W斬C基因在高温、低温、盐害和SA、GA、ABA、ET、MeJA的调控下,都表现为先升后降,再升再降的上调表达模式,但在干旱胁迫中的呈现先升后降的上调模式。(4)-Mx-GFP载体通过构建pBI121p,转化至农杆茜并侵染洋葱表皮观察细胞定位,Ntx主要定位在核上。,结果表明p(5)通过构建pET30a+-Mpc-();畑P载体,转化至大肠杆菌BL21中进行表么结N°果表明表达产物tx具有过氧化物酶活性,且其在30

8、C,200rm/min下振荡0.05pp,--iimmol/LIPTG诱导lOh表达的Ntx具有较高的比活力比活力为8.617化.min。p,其酶g上述研究结果为进一步系统分析Ntpx在烟草中的重要生物学功能及其分子机制奠定基础。关键词:JC原核表达亚细胞定位表达特性。取;;;I湖南农业大学硕上学位论文AbstractOxidativestresswasbroughtduetothestimu

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