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时间：2020-03-09
《临床免疫学—-1免疫印迹检测ENA抗体.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、免疫印迹法检测ENA抗体临床免疫学检验教研室实验目的掌握免疫印迹方法的基本原理、检测ENA抗体的基本操作方法；自身抗体的其它检测方法和相关的临床意义。实验原理酶免疫印迹抗原SDS-PAGE电泳/转膜（点膜）免疫反应（加一抗/二抗）显色试剂和器材1.待测标本；2.检测用膜载体；3.浓缩液；4.酶标二抗；5.显色底物A/B；6.终止液。实验步骤1.配制工作液：按1：10的比例稀释浓缩液.（10ml）；2.向每一反应槽孔加入0.5ml工作液和1份测试条，温育1～2分钟；3.向每一反应槽孔加入待测血清10μl，充分混匀，摇床上反应30分钟；4.弃去槽
2、内液体，加入1ml工作液，洗涤1分钟，重复洗涤4次；5.加入0.5ml工作液，酶标二抗20μl，充分混匀，摇床上反应30分钟；6.同第3步洗涤；7.加入显色液A/B各0.5ml，室温反应10分钟；8.每槽加入终止液0.5ml，混匀，1分钟后弃去槽内液体，用蒸馏水洗涤3次；9.取出测试条，自然干燥后进行结果判定。结果判断1.测试条蓝线与标准谱带“0”线对齐；2.测试条蓝线下方的第一条区带为质控线；3.带型分析。注意事项1.标本溶血、黄疸、高血脂；2.试剂盒使用前恢复至室温；3.取测试条时防止损坏膜上抗原。思考题1.自身抗体、ANA、ENA、抗E
3、NA抗体的联系和区别？
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