沙门氏菌鉴定检验原始记录.doc

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1、沙门氏菌鉴定检验原始记录记录编号：WJ-受理编号样品名称收样日期20年月日20年川R受检单-位检验依据检测仪器检测项目GB4789.4-2010《食品国家女全标准食品中卫生微生物学检验沙门氏菌检验》HHB11-420型电热恒温培养箱（编号:025）、3J0484型奥林巴斯显微镜：（编号:032）、TN-100B型托盘式扭力天平（编号：001）沙门氏菌1.前增菌：（20年刀日）取检样加入含BPW225mL的均质杯中，以2.增菌：（20年月H）轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL,转种于lOmLTTB内，于°C培养h。同时，另取1mL,转种于l

2、OmLSC内，于°C培养h；3.分离：（20年月H）分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板。于—°C分别培养_h（XLD琼脂平板）—h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，BS±可疑菌落形态：※菌落颜色：□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰绿色※周围培养基：□呈黑色或棕色□不变口※□其它：XLD上可疑菌落形态：□粉红色□黄色□黑色屮心□全部黑色的菌落□其它：4.生化试验：（20年刀口）自选择性琼脂平板上分别挑取_个典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜而划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱

3、竣酶试验培养基、蛋口腺水（供做靛基质试验）、丿永素琼脂（pH7.2）、氛化钾（KCN）培养慕和营养琼脂平板，于—°C培养—h,将已挑菌落的平板储存于室温保留24h,以备必要时复查。反应结果见表1、表2,表3为补做试验。表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基内的反应结果r/min均质min,转入锥形瓶°C培养h；三糖铁琼脂赖氨酸脱竣酶试验培养基初步判断斜面底层产气硫化氢注：K：产碱，A：产酸；+：阳性，一：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。表2生化反应初步鉴别表硫化氢（H2S）靛基质PH7.2尿素氛化钾（KCN）赖氨酸脱竣酶反应序号

4、（判断）注：+阳性；—阴性;+/—阳性或阴性;反应序号（判断）:Al、A2、A3或非沙门氏菌。表3补做试验（选做）廿露醇山梨醇ONPG结果判断注：+:阳性，阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。5.血清学鉴定：（20年月日）玻片上划出2个约lcmX2cm的区域，挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体（0）抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对照。再用无菌的接种环或针分别将两个区域内的菌落研成乳状液。将玻片倾斜摇动混合lmin,并对着黑暗背景进行观察。血清凝集结果：（+或-）7.结果：（20

5、年刀U）沙门氏菌。沙门氏菌1•前增菌：（20年月H）取检样加入含BPW225mL的均质杯中，以r/min均质min,转入锥形瓶—°C培养—h；2•增菌：（20年月LI）轻轻摇动培养过的样品混合物，移取lmL,转种于lOmLTTB内，于°C培养ho同吋，另取1mL,转种于10mLSC内，于°C培养h；3•分离：（20年月日）分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板。于°C分别培养—h（XLD琼脂平板）—h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，BS±可疑菌落形态：※菌落颜色：□黑色有金属光泽□棕褐色□灰色□灰

6、绿色※周围培养基：□呈黑色或棕色□不变口※□其它：XLD上可疑菌落形态：□粉红色□黄色□黑色屮心□全部黑色的菌落□其它：4•生化试验：（20年月日）自选择性琼脂平板上分别挑取—个典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱竣酶试验培养基、蛋白月东水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7・2）、氤化钾（KCN）培养基和营养琼脂平板，于—°C培养—h,将已挑菌落的平板储存于室温保留24h,以备必要时复查。反应结果见表1、表2,表3为补做试验。jiff表1在三糖铁琼脂和赖氨酸脱竣酶试验培养基内的反应结果

7、三糖铁琼脂斜面底层产气硫化氢赖氨酸脱竣酶试初步判断验培养基注：K：产碱，A：产酸；+：阳性，一：阴性；初步判断：可疑沙门氏菌属或非沙门氏菌。表2生化反应初步鉴别表硫化氢（H2S）靛基质pH7.2尿素氤化钾（KCN）赖氨酸脱竣酶反应序号（判断）注：+阳性；一阴性；+/—阳性或阴性；反应序号（判断）：Al、A2、A3或非沙门氏菌。表3补做试验（选做）廿露醇山梨醇ONPG结果判断注：+：阳性，一：阴性；结果判断：沙门氏菌或非沙门氏菌。标准规定结果判断沙门菌不得检出复核人:检验人: