饲料中总磷测定.doc

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1、总磷测定测定原理：将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，钒钼酸铵处理，生成黄色的磷-钒-钼酸复合体（(NH4)3PO4.NH4VO3.16MoO3），在波长420nm下进行比色测定。此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。适用范围：适用于配合饲料、浓缩饲料、预混料和单一饲料中总磷测定，测定磷含量0～20ug/mL。仪器设备：1）实验室用样品粉碎机或研钵。2）分样筛：孔径0.45mm（40目）。3）分析天平：感量0.0001g。4）分光光度计：有10mm比色皿，可在420nm下测定吸光度。5）高温炉：可控制温度在550±20℃。6）瓷坩埚：5

2、0ml。7）容量瓶：50ml，100ml，1000ml。8）滴定管：酸式，25或50ml。9）刻度移液管：1.0，2.0，3.0，5.0，10ml。10）凯氏烧瓶：125，250ml。11）可调温电炉：1000W。试剂：分析中所用试剂除特殊要求外，均为分析纯，水为蒸馏水或同纯度水。1）盐酸（化学纯）：1:1（V:V）水溶液。2）浓硝酸（化学纯）。3）钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25g，加硝酸250ml；另称取钼酸铵25g，加蒸馏水400ml溶解。在冷却的条件，将后者倒入前面的溶液，使两种溶液混合，加水定容至1000ml。避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。4）

3、磷标准液：将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，在干燥器中冷却后称取0.2195溶于蒸馏水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即为50ug/mL的磷标准溶液。测定步骤：（1）灰化：称样2～5g左右（精确至0.0001g），置于30mL坩埚中，电炉上（或高温炉300℃）低温炭化至无烟后，550±20℃灼烧灰化3h（可测灰分含量）。（2）消化：冷却后，加入1:1HCl10mL和浓HNO3数滴，小心煮沸（在电砂炉上加热消化）约10min。（3）定容：用热蒸馏水洗涤坩埚和滤纸，将消化后溶液过滤并转移到100mL容量瓶，冷却至室温，定容，摇匀，即

4、为试样分解液。（4）测定：取试样分解液约1～10mL（磷含量50～750ug）于50mL容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10mL，定容至刻度，空白调零，测定吸光度。标准曲线绘制：吸收此标准溶液0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，14.0mL盛入50mL容量瓶，加显色剂10mL，用蒸馏水稀释至刻度。此时容量瓶中磷浓度为0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，14.0µg/mL。静置20min，比色。建立磷浓度与吸光度标准曲线。计算公式：查对磷标准曲线，计算磷浓度，换算植酸磷含量。公式：其中，Y，吸光度；K，斜率；X，由磷

5、标准曲线查得的磷浓度µg/mL；W，待测样品中磷百分含量，%；V0，比色时所用容量瓶容积，mL；V1，试样分解液总体积，mL；V2，移取试样分解液体积，mL。M，试样质量，g。