辣椒红色素的提取.ppt

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1、辣椒红色素的提取一、实验目的了解从现代分离技术分离活性有机化合物的过程和基本操作；掌握薄层色谱板、色谱柱的制作及用以分离技术；二、实验原理辣椒是茄科植物辣椒的果实，因其具有独特的风味在全世界普遍种植使用。我国是辣椒的种植大国，全国有五、六百万亩辣椒。我国的辣椒分为福建的小米椒、四川的朝天椒、江南的羊角椒、河南的樱椒、山东的大红椒等辣椒果实所含辛辣成分为辣椒碱类物质二、实验原理辣椒红色素是一种存在于成熟红辣椒果实中的四萜类橙红色色素。其中极性较大的红色组分主要是辣椒红素和辣椒玉红素，占总量的50%～60%；另一类是极性较小的黄色组分，主要成分是β-胡萝卜素和玉米黄质。辣椒红色素不仅色泽

2、鲜艳，热稳定性好，而且耐光、耐热、耐酸碱、耐氧化，无毒副作用，是高品质的天然色素，广泛用于食品、化妆品、保健药品等行业二、实验原理国内外辣椒红素的生产方法主要有油溶法、超临界萃取法和有机溶剂法三种。本实验是以二氯甲烷为萃取溶剂，从红辣椒中只萃取出色素，经浓缩后用薄层层析法作初步分析，或用柱层析法分离出红色素，并测定其紫外吸收。二、实验原理目前世界各国均批准使用辣椒红色素，国际国内市场潜力很大，前景乐观。辣椒红是目前世界销量最大的天然色素，也是最走俏的产品。美国一年需4000t天然色素，其中辣椒红色素约1000t，日本每年需辣椒红约500t，加拿大、澳大利亚、新加坡、西欧市场的需求量也

3、很大。世界每年对辣椒红色素的需求量约8000t，国际市场潜力很大。我国辣椒资源十分丰富，南北均有种植，大量出口韩国、日本、欧共体等。辣椒红色素国内市场需求很大，国内三资企业出口产品和婴幼儿食品生产厂、饮料厂均使用天然辣椒红色素。三、实验试剂与器材实验材料：干燥红辣椒（辣椒尽量研细，提高提取效率）试剂：二氯甲烷、硅胶G（200~300目）、沸石、石油醚、二氯甲烷。仪器：100mL圆底烧瓶、球形冷凝管、布氏漏斗、漏斗、吸滤瓶、广口瓶、色谱柱、锥形瓶、玻璃棒、200mL烧杯、100mL烧杯、50mL烧杯、毛细管、滴管、滤纸、硅胶薄层板、量筒、层析缸、恒温水浴锅、循环水多用真空泵，紫外光谱仪

4、。四、实验步骤1．色素的萃取和浓缩将干的红辣椒剪碎研细，称取2g－5g，置于100mL圆底烧瓶中，加入30mL二氯甲烷和少许沸石（两三粒），装上索氏提取器，70-80℃水浴加热回流提取30分钟。冷至室温后抽滤。蒸馏浓缩至干即为混合色素的粗品（小心水进入容器，影响干燥的速度和效果）。称重，计算得率。2．柱层析分离选用内径1cm，长约15-20cm的层析柱，用硅胶20g，再将40-60ml二氯甲烷与20g硅胶调成糊状（如不能调成糊状，可以多加二氯甲烷，硅胶和二氯甲烷用量可以根据柱的大小灵活调整，硅胶柱的高度达到便于加样和操作就可以），通过大口径固体漏斗加入到柱中，边加边轻轻敲击层析柱，使

5、吸附剂装填致密，并保持层析柱中的固定相不干(其二氯甲烷液面高出砂层2cm即可)。四、实验步骤2．柱层析分离再打开活塞，待二氯甲烷液面与硅胶上层的砂层平齐时，用滴管汲取混合色素的浓缩液（0.5-1ml）滴入柱顶，再打开旋塞，待色素溶液液面与硅胶上层的砂层平齐时，用滴管缓缓注入少量洗脱剂（二氯甲烷）淋洗，观测记录色素的分离情况，并用不同的接收瓶分别接收流出柱子的色带。当色带完全流出后停止淋洗。将相同颜色组分的接收液合并，水浴中蒸馏浓缩，收集色素。四、实验步骤3．柱效和色带的薄层检测取一块硅胶薄层板，划好起始线，用毛细管点样。其中一个是混合色素浓缩液，另外分别是第一、第二、第三色带。用体积

6、比为1:3的石油醚：二氯甲烷混合液作展开剂展开。记录各斑点的大小、颜色并计算其Rf值，比较各色带的Rf值，如有标准品辣椒红的脂肪酸酯、辣椒玉红素和β-胡萝卜素对照，指出各色带是何化合物。观察各色带点样展开后是否有新的斑点产生，推估柱层析分离是否达到了预期效果。四、实验步骤4．红色素的紫外吸收将柱中分得的红色带浓缩蒸发至干，作紫外光谱，确定λmax。四、实验步骤1．本展开剂一般能获得良好的分离效果。如果样点分不开或严重拖尾，可酌减点样量或稍增二氯甲烷比例。2．不可用同一支毛细管汲取不同的样液。3．回流速度不可过快，以防浸泡提取不充分4．尽量将溶剂蒸干五、注意事项六、思考题1．层析柱中有

7、气泡会对分离带来什么影响？如何除去气泡？2．层析过程中有时会出现“拖尾”现象，一般由什么原因造成的？对层析结果有何影响？如何回避“拖尾”现象？3．如果样品不带色，如何确定斑点的位置？举1~2个例子说明。