血清HBsAg定量检测及探讨.doc

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1、血清HBsAg定量检测及探讨-从检验者角度看HBsAg定量航若免疫发比检测技术在临床实验室普及应用.对HBVMi免疫学标志物（HBV-M,或称乙肝“五项”）的定就检测II渐成为现实•并迅速被临床认识及认可。M-HBs（HBV农面抗体）是最早被实现定就检测的折标•目前普遍采用粕0标准定就.结果以IU/L为单位.其线性范围可达lOOOIU/Lo研究认为自然感染HBV痊愈后产生的抗・HBs介于1O-1OOIU/L,足以对HBV起到保护作用。有效的HBV疫苗接种所产生的抗-HBs多大于1OOIU/L,抗-HBs小于10IU/L是HBV免疫的临界量值。在肝移

2、植术后针对HBV的被动免疫治疗过程中抗-HBs定量值也十分有用.可以用来估算乙肝免疫球蛊白（HB【G）的用量及给药间隔。可见抗-HBs定址対于乙肝防治发挥了巫要作用。近期肝病治疗界对HBsAg定盘再次给于了岛度关注.以血済HBsAg定暈作为慢乙肝抗病毒疗效观察及治疗终点预测已得到国际认可。我们对2004年1月至今五年内涉及HBsAg定量的文章进行检索,以HBsAg定塑作为主题词，检索中国知网（中国学术文献网络出版总库）,共查到45篇相关文献。在PubMed使用HBsAgassay与HBsAglevel作为主题词，査到相关文献32篇。综合这些文献的结

3、论大致如下:1）血HBsAg定慑分别与HBVDNA定最及肝内cccDNA定最存在相关性;2）血清HBsAg定；g可作为干扰素或核昔类似物抗病毒疗效及治疗终点的评估指标。在实际工作中.我们也经常而临临床与检验界同行对HBsAg定呆的询问。作为一项新的检验抬标.如何发挥HBsAg定呆在IIBV诊疗中的作用.需要临床医生与检验人员共同努力.合理应用并理解血淸HBsAg定呆检测中可能存在的问題》1.HBsAg的本质1963年澳大利亚科学家Blumberg首次发现澳大利亚抗原（后简称“澳抗”）°后来研究表明“澳抗”既是HBY表面的膜蛋白颗粒.因此将“澳抗”改

4、称为HBV表面抗康（HBsAg）oHBsAg是HBV感染的重要血清学标志物,其可诱导机体产生抗-HBs抗体,后者是有保护性的中和抗体。己知HBsAg有9种血淸亚型,是由一个特异的共同抗原决定鎂V和至少两个亚型决定簇“d/y”和5/严所决定•我国最常见的血淸型为那伽、adroHBsAg在HBV表面的结合松散，容易脱落入血‘HBsAg在血済中以三种形式存在：一种是小球形颗粒，直径22nm；一种足丝状或管形颗粒，直径22nm,长200-700晌被认为是小球形颗粒的集合。两种颗粒均不含HBV遗传物质.因业不具有感染性；此外.一些结合在包朕衣面的HBsAg与

5、HBVDM共同构成完整的病奇彼隸为I）“nc颗粒.I）“nc颗粒有很强感染性。在HBV感染者血清中.小球形颗粒最多，Dane颗粒最少.非感染性HBsAg颗粒与Dane颗粒之比可达103-10人感染HBV后绝大多数外周血可出现HBsAg.含呆在5ng/ml~600pg/ml之间，高者可达2000ug/ml°HBsAg与Dane颗粒的这种:&值差异与关系不固定性.无疑会彫响HBsAg定量值对曲2颗粒的相关性的推算。2.HBsAg检测的瓶颈■钩状效应免疫学检测中的钩状（Hook）效应指抗原抗体结合反应中•结合的强弱及结合的多少与抗原抗体的比例有密切关系

6、•由于某〜成分过量而可导致抗原抗体反应诫弱找至出现假阴性结果。钩状效应在一步法的ELISA检测中农现十分突出。在HBV-M的检测中，常见到HBeAg.抗-HBc强阳性而HBsAg呈阴性或弱阳性的标本，英中相当一部分是由丁•钩状效应导致•原因正在于血済内有大量的游离HBsAgoirilif大多数液相发光试剂检测HBV-M时采用了两步法，钩状效应的影响有所减弱.但并未完全消失。我们实验室対某知名发光噸理的进口试剂检测HBsAg的钩状效应进行观察•髓机选取3份HBsAg.IIBeAg与抗HBc阳性的三份标本,系列稀释后检测HBsAg.发现HBsAg结果仍

7、受钩状效应影响.随着稀鏗比例増加,HBsAg的C0I值逐渐增加（表1）。可见.即便基于发光原理的HBsAg检测试剂.钩状效应仍然存在。冇的临床医生谋把代表半定眾的C0I值当做定导临床.可能遇到当患者HUVDNA卜降.反而HBsAg的C01值升高的现彖，就是询状效应対HBsAg检测的彫响。此类反应在其它研究中也有报道.表1应用某进口发光试剂检测三例e抗JM阳性恵者HBsAg结果标志物HBsAg稀释HBeAHBcA标本/(C0I)811：lx2:41:81«161:321641:/C0I/C0IA3.2486.5969941■1373117562067

8、5182210.00B7.2312.46461610323568425660674136050.00C0.9491.192