不同稀释液对血清中hbsag定量测定的影响

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1、不同稀释液对血清中HBsAg定量测定的影响：胡伟，毕永春，宋景秋，戴蕾【摘要】目的：探讨不同稀释液对血清中高浓度HBsAg测定结果的影响。方法：将11例HBsAg高值的乙肝患者血清分别用HBsAg专用稀释液、生理盐水、混合低值血清及蒸馏水稀释，然后用ARCHITECTi2000SR化学发光分析仪测定其HBsAg值。结果：用生理盐水和蒸馏水稀释的血清标本测得的HBsAg值与用专用稀释液稀释后测得的HBsAg值比较存在统计学差异，而混合低值血清与专用稀释液所测值相比较差异无统计学意义。结论：除专用稀释液外，混合低值血清可以用于ARCHITECTi2000SR化学发光分析仪测定高浓度H

2、BsAg的替代稀释液，而生理盐水和蒸馏水不能用作稀释液测定高值HBsAg。【关键词】乙型肝炎表面抗原;稀释液;化学发光免疫法　　[Abstract]Objective：ToexploretheinfluenceofthedifferentdiluentstohepatitisBsurfaceantigen(HBsAg)inhumanserum.Methods:11hepatitisBpatientsserum,normalsalineanddistilledmunoassayanalyzer.Results:SerumspecimenofHBsAgdilutedalsaline

3、ordistilledinationofHBsAgdilutedparingcanbeasubstituteforspecializeddiluentstoArchitecti2000SRimmunoassayanalyzeralsalineanddistillediluminescenceimmunoassay　　我国是乙型肝炎病毒(hepatitisBVirus，HBV)感染的高发区，HBV感染的诊断主要依赖于患者血清中病毒标志物和病毒核酸(HBVDNA)的检出。乙型肝炎表面抗原(hepatitisBsurfaceantigen，HBsAg)是HBV表面的外膜蛋白，由病毒S基

4、因编码，在病毒感染肝细胞过程中起重要作用。最近一些研究证明HBsAg和HBVDNA水平之间有良好的相关性[1-2]，定量检测血清中HBsAg可以反映宿主体内HBVDNA的水平，对评价抗病毒药物治疗的疗效和判断预后有重要意义[3]，同时对于一些HBVDNA呈阴性的慢性乙肝患者，血清中HBsAg的含量就为临床医生的诊断及治疗提供了良好的依据。目前，我院采用ARCHITECTi2000SR化学发光分析仪对血清中的HBsAg进行定量检测。临床上有些乙肝患者HBsAg定量测定结果超出该仪器所能检测的线性范围，为了得到准确、可靠的实验结果，帮助临床医生更好地了解疾病进展，常需要对高浓度HBs

5、Ag血清进行稀释后再测定。　　1材料和方法　　1.1血清标本　　筛选收集乙肝患者血清HBsAg定量>250IU·ml-1的标本血清，标本于南京市鼓楼医院门诊。标本要求无明显溶血、脂血。　　1.2混合低值血清制备　　收集本院住院病人中乙肝两对半定量结果全阴性的血清标本，混匀后2000r·min-1离心取其上清液(经检测HBsAg为0.02IU·ml-1)。　　1.3仪器与试剂　　美国雅培公司生产的ARCHITECTi2000SR全自动化学发光仪及配套试剂(含HBsAg专用稀释液)、生理盐水、蒸馏水、自制混合低值血清等。　　1.4实验方法　　将不同患者的高浓度HBsAg血清(&

6、gt;250IU·ml-1)分别用专用稀释液、生理盐水、混合低值血清及蒸馏水按照1∶100的比例(5μl血清加入495μl稀释液)稀释，充分混匀后取双份上机检测HBsAg含量。操作步骤严格按说明书进行，测定在1h内完成。　　1.5统计方法　　用MicrosoftExcel系统对数据进行分析,组间比较用配对t检验，P<0.05为差异有统计学意义。　　3讨论　　雅培ARCHITECTi2000SR全自动免疫分析仪核心技术为化学发光微粒子免疫分析(chemiluminesentmicropaticleimmunoassay)，以吖叮酯作为标记发光剂，主要用于测定蛋白质、病毒抗原等

7、大分子物质，试剂具有极高的灵敏度、特异性和稳定性。它对HBsAg的可测范围是0～250IU·ml-1，而临床上有些血清的HBsAg往往超出了该检测范围，所以需要稀释后再测定，但是由厂家提供的专用稀释液价格相当昂贵且保存有效期很短，有时会有供货不及时或稀释液超过有效期的情况发生。本研究通过用生理盐水、混合低值血清、蒸馏水作为稀释液来稀释高浓度的HBsAg血清，旨在探讨三者对血清HBsAg测定的影响，以期选择出合适的稀释液来代替专用稀释液。免疫反应体系中的蛋白分子种类及含量、pH值、