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1、现代电泳技术的临床应用Sebia1使用范围和检测原理电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小,形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离,鉴定或提纯的技术.在生化检测中,主要用于分离各类蛋白分子.2发展历程1809年俄国科学家列伊斯首先发现电泳现象1937年瑞典科学家Tiselius建立了界面电泳技术,并首次证明了血清是由白蛋白及α,β,γ球蛋白组成的因此获得1948年诺贝尔化学奖.1950年后,区带电泳从发展到成熟.1980年以来,毛细管电泳逐渐受到重视3常用的电泳技术滤纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳:琼脂糖
2、凝胶适用于蛋白质和核酸的电泳支持介质,成本低,结果易保存.聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的定性分析蛋白质的电泳方法,特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量,一般用于科研.毛细管电泳:经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物4电泳技术的医学应用蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手段,可全面精确,描绘出患者蛋白质的全貌.对疾病的早期诊断,疗效观察及预后判断具有非常重要的临床价值.5蛋白的电泳检测根据使用的染料或者是底物的不同，我们可以检测到不同类型的蛋白:血清蛋白脂蛋白(运送脂类)各种酶类血红蛋白6电泳技术在临检中的应用急,慢性炎症造血系统疾病:多发性骨髓瘤,巨免疫球蛋白血症肾脏疾病肝脏疾病中枢神
3、经系统疾病:多发性硬化症遗传性疾病:地中海贫血代谢性疾病:糖尿病心血管疾病:心梗,动脉粥样硬化恶性肿瘤7正确解释电泳结果 为临床对疾病的判断提供可靠参考89gba2白蛋白a1:a1酸性糖蛋白,a1抗胰蛋白酶:结合珠蛋白,a2巨球蛋白,a脂蛋白,铜蓝蛋白:转铁蛋白,血液结合素,C3补体,b脂蛋白:免疫球蛋白血清蛋白电泳10蛋白染色血清蛋白电泳后会呈现出5或者6条带.染色后,每个条带呈现出的不同程度的染色对应着各自的蛋白浓度.如何检测染色程度:需要使用光密度仪.11正常的电泳图谱12出现单克隆免疫球蛋白的电泳图谱13蛋白电泳检测的不同步骤制备胶片,加样,启动电源,开始电泳,染色,脱色,结果检
4、测14血清蛋白电泳的目的是什么?检测异常:含量的变化:条带中蛋白含量的增加或减少性质的变化:异常条带的出现15临床意义将电泳作为常规检测之一,基于蛋白含量的变化,有助于我们对以下疾病的筛查:炎症营养不良肺气肿16临床意义对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病:骨髓瘤巨球蛋白血症(Waldenstrom)细菌和病毒感染在这些情况下,必须要做其他辅助测试,比如说免疫固定,使用不同类型的抗血清对异常蛋白进行检测.(对于后期治疗有很重要的指导意义)17电泳结果的临床应用及常见电泳结果分析电泳检测18什么情况下必须进行电泳检测?A/G比例变化血液沉降速度发生异常变化出现恶性疾病征兆在免疫球蛋白定量
5、检测中发现某一种免疫球蛋白出现大量异常增加19电泳区带分析20双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现附属条带可能是由以下原因造成:遗传性双白蛋暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺激导致的急性胰腺炎导致的双白蛋白血症:大量的胰酶的出现可以导致白蛋白降解白蛋白区带21双白蛋白血症22双白蛋白血症2324在下列情况下白蛋白会出现下降:-肾病综合症,蛋白流失,胃肠病:检查尿蛋白-淋巴细胞增生综合征-营养不良-肝脏功能不全-慢性炎症-严重烧伤-血液稀释25在下列情况中白蛋白会出现增加:-脱水症状-血液浓缩-白蛋白注射26Alpha1globulins(α1球蛋白区带)将会在下列情况下出现下降:
6、-蛋白流失-肝功能不全-先天性抗胰蛋白酶缺乏症出现两个条带:-抗胰蛋白酶的不同基因型出现增加:-炎症症状27A1AT不同的基因型28A1AT等电聚焦电泳29急性炎症电泳图谱30Alpha2globulins(α2球蛋白区带)下列情况中出现下降:-肝功能不全-血管内溶血31出现两个条带:-溶血标本(结合珠蛋白-血红蛋白复合体)-结合珠蛋白不同基因型-出现单克隆免疫球蛋白(带有大量负电荷)*Alpha2条带在电泳图谱中,是一个很特殊的条带.因为这一条带中含有五种蛋白:HDL,Haptoglobin,Alpha2Macroglobulin,CeruloplasminandGcglobulin.由
7、于结合珠蛋白有不同的基因表现型,增加了这一条带的复杂程度.结合珠蛋白非常靠近Alpha1条带;出现溶血时结合珠蛋白的迁移率会发生改变.同时,由于HDL的含量或者是存放过久的标本,HDL的迁移速度可能会更快.32溶血的标本33出现在a2区域的单克隆免疫球蛋白34下列情况下Alpha2区域会出现增加现象:-炎症症状-肾病综合征-出现游离轻链35肾病综合征363738Betaglobulins(β球蛋白区带)在下列情况下会出现
