全蛋白提取组织裂解液配方.doc

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1、Western-Blot全蛋白提取组织裂解液配方1.储备液1.110%TritonX-100TritonX-10010ml蒸馏水90ml混合后37℃-40℃水浴中2-3hr,使其充分混匀1.210%去氧胆酸纳去氧胆酸纳1g蒸馏水10ml避光保存1.3200mmol/LPMSF(苯甲基磺酰氯)PMSF174.2mg异丙醇5ml分装,-20℃保存1.4100mmol/LEDTAEDTA372.24mg蒸馏水10ml1.51mg/mL亮抑酶肽(Leupeptin)亮抑酶肽2mg蒸馏水2ml分装,-20℃保存1.61mg/mL抑蛋白酶肽(Aprotinin)抑蛋白酶肽2mg蒸馏水2ml分装,-20℃

2、保存1.71mg/mL胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)胃蛋白酶抑制剂2mg甲醇2ml分装,-20℃保存1.工作液1.1Tris-base(50mmol/L,pH7.4):Tris-base605mgNaCl900mg蒸馏水75ml用HCl调整pH值为7.41.210%TritonX-10010mL1.310%去氧胆酸纳2.5mL1.4100mmol/LEDTA1mL1.5用前加入:1mg/mL亮抑酶肽100ml1mg/mL抑蛋白酶肽100ml1mg/mL胃蛋白酶抑制剂100ml200mmol/LPMSF500ml各成分的终浓度Tris-base50mmol/L,pH7.4TritonX-

3、1001%去氧胆酸纳0.25%NaCl150mmol/LEDTA1mmol/L亮抑酶肽1mg/mL抑蛋白酶肽1mg/mL胃蛋白酶抑制剂1mg/mLPMSF1mmol/L

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