血细胞分析仪测定原理与参数解析ppt课件.ppt

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1、血细胞分析仪测定原理与参数解析1简介血细胞分析仪检测原理血细胞分析仪检测参数原理检测参数（报警）临床应用2简介3自动血细胞分析仪,早年称血细胞技术仪，已是目前国内外临床检验最常用的筛检仪器之一。20世纪50年代初，美国W.H.Coulter申请了粒子计数法的技术专利，在世界上研发了第1台电子血细胞技术仪，并应用于临床，开创了血细胞计数的新纪元。从此，随着基础医学和高科技，特别是计算机软件技术的发展，其检测原理逐渐完善，检测技术不断创新，检测的参数显著增多。4传统手工法显微镜血细胞计数或分类方法，不仅速度慢，而且因操作过程的随机误

2、差、实验器材的系统误差和检测方法的固有误差，检测的精密度不高。“精度高、速度快、易操作、功能强”是血细胞分析仪的强劲优势，还可和血涂片制备和染色仪进行组合，由后者完成血细胞分析仪检测后的形态学复检。5现代血细胞分析仪的功能有:1.全血细胞计数功能（红细胞、白细胞和血小板计数及其相关的计算参数）.2、白细胞分类功能（三分类或五分类白细胞百分率和绝对值）.3、血细胞计数和分类功能的扩展功能，包括：有核红细胞计数、网织红细胞计数及其相关参数检测；未成熟粒细胞、幼稚粒细胞、造血干细胞计数；未成熟血小板比率；淋巴细胞亚型计数；细胞免疫表型

3、检测等。6血细胞分析仪检测原理一、电阻抗法二、射频电导法三、激光散射法7悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液为非导电颗粒，其电阻比电解质溶液大，利用两者导电性能的差异，体积大小不同的血细胞（或类似颗粒）通过计数小孔时，可引起小孔内、外电流或电压的变化形成与血细胞数量相当、体积大小相应的脉冲电压，从而间接区分出细胞群，并分别进行计数，这就是电阻抗原理即库尔特原理。电阻抗法可精确测量出细胞（或类似颗粒）的大小，是三分类血细胞分析仪的主要应用原理。电阻抗法还与光学检测原理组合应用于五分类血细胞分析仪中。一、电阻抗法血细胞计数原理

4、电阻抗法细胞计算原理8二、射频电导法射频指射频电流，是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波。电导性即电的传送性能。高频电流能通过细胞壁。用高频电磁探针渗入细胞膜脂质层可测定细胞的导电性，提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质（如比例）、颗粒成分（如大小和密度）等特征性信息。电导性特别有助于鉴别体积虽相同、但内部结构性质不同的细胞（或相似体积的颗粒）如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞两者直径虽均9~12um，但在高频电流检测时，因两类细胞不同核质比例而出现不同的检测信号。射频电导法结合其他检测原理一起应用于血细胞分析仪中。射频电流检测原理

5、9三、激光散色法流式细胞术检测原理将经试剂稀释、染色、球形化的细胞（或其他颗粒）悬液注入鞘液流中央，单个细胞随悬液和鞘流液两股液流整齐排列，以恒定流速定向通过石英毛细管。鞘流技术1.检测光；2.细胞流；3.前鞘流；4.后鞘流；5.流液方向10三、激光散色法流式细胞术检测原理当细胞（或其他颗粒）通过激光束被照射时，细胞（或其他颗粒）因本身的各种特征（如体积大小、染色程度、细胞成分浓度或细胞核密度等），可阻挡或改变激光束的方向，产生与细胞（其他颗粒）特征相应的各种角度的散色光。置放在石英毛细管周围不同角度的信号检测器（光电倍增管）接

6、受到特征各异的散色光。来自低角度散色光（或称前向散色光）的信息，反映细胞（或其他颗粒）的数量和表面体积大小；来自高角度散色光（或称侧向散色光）的信息，反映细胞（或其他颗粒）的内部颗粒、细胞核等复杂性。流式细胞术检测通道和光路系统11三、激光散色法流式细胞术检测原理如细胞（或其他颗粒）用荧光染料染色,则染色后的细胞（或其他颗粒）被激光照射时，可产生不同波长的荧光散射，可用检测器接受散射荧光。将来自各种散射光的信息进行综合分析，即可准确区分正常类型的细胞（其他颗粒）。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时，比电阻抗法血细胞分

7、群更准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。12激光散射法系统基本组成名称组成及评价光源气体（氦-氖、氩气等）激光或固体（半导体）激光（单色光）；钨光源（多色光）鞘流维持颗粒于液流中央，顺序、单个、恒速向前流动，即流体动力学聚集细胞悬液被检测细胞（颗粒）的悬液，由气压导入流动池光检测器接受来自各种角度的散射光或吸收光信号，并转换成相应特征的电信号13血细胞分析仪检测参数原理一、白细胞系列参数检测原理二、成熟红细胞系列参数检测原理三、血小板系列参数检测原理四、血红蛋白浓度测定检测原理14一、白细胞系列参数检

8、测原理151、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法检测通道：（1）4DIFF通道：利用激光流式细胞术、核酸荧光染色技术，采用专一溶血剂解红细胞和血小板，而白细胞膜仅部分溶解出现小开口，核酸荧光染料聚次甲基进入受损的白细胞内，与DNA、RNA和细胞器结合，使