血细胞分析仪检测原理ppt课件

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1、河北医科大学第四医院东院检验科杨红芳血细胞分析仪检测原理库尔特和血细胞分析仪血球之父---库尔特一电阻抗法检测原理(库尔特原理)1.白细胞检测LymphocyteMonocyteGranulocyte淋巴细胞大单个核细胞群粒细胞淋巴嗜碱单核嗜酸中性粒细胞二联合检测型原理主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方法将血含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用了鞘流技术。前鞘流后鞘流检测窗1.VCS检测技术光散射传导性电阻抗每个细胞接受三维分析定义到三维散点图的相应位置(1).Conductivity—传导性—针对细胞内部结构的测量方法利用高频电磁波对细

2、胞传导性的特点,检测:细胞核大小细胞核密度细胞核结构核浆比—异淋和淋巴全角度:10°-70°的全角度激光散射量它是准确区分嗜酸性细胞和中性粒细胞的一个重要参数。(2)LaserScatter—激光散射—针对细胞颗粒特性的测量方法VCS白细胞分类VCS电阻抗技术细胞内部结构细胞内的颗粒性、核分叶性和细胞表面结构MAPSS0°:前向散射光:细胞大小、数量10°:侧向散射光:细胞内部结构及核染色质的复杂性90°:垂直角度散射光:细胞内部颗粒及分叶状况90°D:垂直角度去偏振散射光,鉴别E与N2.多角度偏振光散射法(MAPSS)3.光散射与细胞化学技术联合应用(1)过氧化物酶(Per

3、oxidase,Perox)染色通道过氧化物酶活性强度:E>N>M,L和B则无。(2)嗜碱性粒细胞/分叶核(baso/lobul-arity)通道:除B外其他细胞仅剩裸核,不同细胞的裸核结构不同,分叶越多散点越靠近横轴右侧,根据多分叶核和单个核的比例,可计算出左移指数。4.电阻抗、射频与细胞化学联合这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过4个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。(1)嗜酸性粒细胞检测系统(2)嗜碱性粒细胞检测系统(3)淋巴、单核和粒细胞检测系统(4)幼稚细胞检测系统5.双鞘流动力连续系统(DHSS)用钨光源流式细胞光吸收

4、、化学染色和电阻抗法①WBC计数通道:电阻抗法②嗜碱性粒细胞通道:专用染液③WBC分类通道:双鞘流系统中,用流式细胞光吸收、电阻抗和细胞化学染色液联合检测除B以外的WBC。白细胞分类散射图联合使用多项技术(流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色)同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而得出较为准确的白细胞“五分群”结果。三血红蛋白测定原理血红蛋白测定采用光电比色原理血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统特定波长(530~550nm)下进行光电比色血红蛋白血红蛋白衍生物吸光度Hb浓度溶血剂λ=5

5、40nm血红蛋白测定的溶血剂溶血剂含氰化物的溶血剂不含氰化物的溶血剂

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