《薄层色谱》PPT课件.ppt

《《薄层色谱》PPT课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、薄层色谱实验原理利用混合物中各组份的物理化学性质的差别，在层析过程中，在不相溶的两个相中分布的不同，达到分离目的。两个相:一个是涂布在薄层板上的吸附剂，叫固定相(吸附剂最常用的是氧化铝和硅胶)，另一个是在展开过程中流过固定相的展开剂（有机溶剂），叫流动相。由于吸附剂对混合物中不同物质的吸附力不同，对极性大的物质吸附力强，对极性小的物质吸附力弱。因此当溶剂流过时，不同物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附、解吸附、再吸附、再解吸附。易被吸附的物质相对移动较慢，在薄层板上移动的距离就小；反之，较难被吸附的物质相对移

2、动较快一些，在薄层板上移动的距离则大。经过一段时间的展开，混合物中各组份在薄层板上连续不断地进行吸附和解吸附过程，从而使各组份移动的速度产生差异，不同物质就被彼此被分开，最后形成互相分离的斑点。薄层色谱法优点1.展开时间短；2.分离能力强，斑点集中；3.灵敏度高，几至几十微克的物质即可被检出；4.显色方便，可直接喷洒腐蚀性的显色剂5.所用仪器简单，操作方便，可以普及；6.薄层板价格低廉,一块板可同时检测多个样品；7.色谱直观性强。薄层色谱法的应用1.用于药品和制剂的质量控制及杂质检查2.控制化学反应进程，反应副产

3、物的检查及中间体的分析3.探索柱色谱的分离条件4.精制和制备纯品的药物5.临床和生化检验6.毒物分析7.中药成分分析和含量测定8.中药材品种真伪检查及其代用品寻找9.其它微量鉴定和分析反式偶氮苯在光照下吸收紫外光形成活化分子。活化分子失去过量的能量返回顺式或反式基态，得到顺式和反式异构体。反式偶氮苯的偶极矩为0，顺式偶氮苯的偶极矩为3.0D，利用两者极性不同把它们分离。经过薄层层析后，没有经过光照的偶氮苯在薄层板上只有一个斑点，而经过光照的偶氮苯有两个斑点。顺、反偶氮苯异构体进行分离、分析在薄板上混合物的各个组分

4、上升的高度与展开剂上升的前沿之比称为该化合物的比移值，用Rf表示。前沿线色斑起始线薄层色谱示意图比移值实　验　装　置薄层板的制备与活化将1.5g硅胶G在搅拌下加入到盛有5ml去离子水的小烧杯中，调成有粘稠度的浆料(5-10min)立即倒在玻璃板上，用手指夹住两边，沿水平方向轻轻振荡，使浆状物表面光滑且均匀地附在载玻片上，水平放置。用同样的方法再制一块。要求薄层板的厚度为0.25mm。将薄层板于室温下在水平台上晾干，置于105℃-110℃烘箱中活化30分钟,贮于干燥器中冷却备用。实验步骤2.点样在薄板一端1cm处用

5、笔轻轻画一横线作为起点线，用内径为1mm，管口平整的毛细管垂直点在起点线上。注意动作要轻，毛细管口不要碰到吸附剂。如果溶液过稀，一次点样后样品量过少，可在前一次点样干燥后，在原处再点。点样的直径不要超过2mm。因为斑点过大，会造成拖尾、扩散，影响分离效果。如果需要点多个样，点之间距离不小于1～1.5cm。薄层色谱的展开是在密闭容器中进行的。将展开剂（6mL环己烷和2mL苯的混合物）倒入层析缸中，待层析缸中充满溶剂蒸气后，将点好样的层析板放入缸中展开。点样的位置必须在展开剂液面之上。当展开剂展开至距顶端0.5～1c

6、m时，取出层析板用铅笔画出溶剂前沿位置，晾干。3.展开前沿线色斑起始线薄层色谱示意图常用的显色手段：紫外灯，显色剂如碘、硫酸等4.计算Rf实验结果样品X样品Y板1Rf板2Rf平均Rf4.划线点样：在活化好的板上离底部约1cm的地方轻轻的划一条线，用毛细管在线上点一个已知样和一个未知样，样品圈不能大于2mm.5.将点好样的板放入层析缸，展开，在展开剂离顶部1cm的时刻取出，用铅笔画出前沿的位置，并划出斑点的位置。6.在另一块板上重复一次实验。7.计算顺反偶氮苯的的比移值，并确定哪个斑点是顺式偶氮苯。注意事项1．层析

7、缸不要洗，废液要倒入废液缸2．薄板要放平。3．注意观察展开剂的位置，作好标记。A.会使点样里的组份分不开B.可能会淹没所划出来的细线,从而溶解所点的样C.展开剂会挥发出来D.展开剂与硅胶G发生反应1.展开剂如果过多，会有何后果？(B)A.所点的试样的样点的圈太大B.铺的薄板不均匀C.薄板放的不平衡D.薄板老化时间不够2.如果斑点出现拖尾现象,这可能是什么原因?A3.若分离极性很小的物质,最好采用哪种展开剂?A.环己烷B.四氯化碳C.丙酮D.乙酸D4.在液相合成实验中,需要快速得知反应物料里面是否有新物种时,采用哪

8、种方法较快捷方便?(C)或如何判定两瓶试剂是否为同一种物质？A.气相色谱B.液相色谱C.薄层色谱D.柱色谱