在线净化液相色谱-串联质谱法测定畜禽粪便中7种β2-受体激动剂.pdf

《在线净化液相色谱-串联质谱法测定畜禽粪便中7种β2-受体激动剂.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第42卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第12期2014年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1797～1803DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．140719在线净化液相色谱-串联质谱法测定畜禽粪便中7种2-受体激动剂李丹妮严凤吴剑平周悦榕顾欣张鑫(上海市动物疫病预防控制中心，上海201103)摘要建立了同时测定畜禽粪便中福莫特罗、沙美特罗、卡布特罗、克伦异磅特罗、克伦潘特、克伦塞罗和羟甲基克伦特罗7种一受体激动剂的超高效液相色谱一串联质谱(UPLC—MS／MS)分析方法。样品经酸性乙腈充分提取后，再用0．2％甲酸

2、溶液稀释，提取液用阳离子交换在线净化柱(HyperSepRetainCX)净化，2％氨水一甲醇溶液将分析物洗脱转入至HypersilGoldC。分析柱，经色谱分离后，用串联质谱检测。在正离子电喷雾条件下，采用选择反应监测模式检测，以外标法定量。结果表明，7种受体激动剂在0．5～100L的浓度范围内线性良好，线性相关系数均大于0．9928。取3倍信噪比下，畜禽粪便中7种受体激动剂的检出限为1kg，定量限为5kg。在空白猪、鸡粪便中添加5～50kg水平的7种受体激动剂，得到平均回收率为67％～112％，其相对标准偏差为2．9％～10．2％。本方法简单快速，适用于畜禽粪便中一受体激动剂残留的定量

3、及确证分析。关键词在线净化液相色谱一串联质谱；7种一受体激动剂；残留；畜禽粪便1引言／32-I~上腺素能激动剂，简称／3：一受体激动剂，俗称“瘦肉精”，在动物体内(猪、鸡)可通过增加蛋白质合成，促进脂肪组织的分解代谢，显著提高酮体瘦肉率¨J。随着农业部176号公告J、193号公告和1519号公告的陆续出台，饲料中常见一受体激动剂(如克伦特罗、沙丁胺醇等)的违法使用情况已得到了有效遏制，但是福莫特罗、克伦潘特、克伦塞罗等新型一受体激动剂也有被使用的趋势，并已逐步引起重视。目前，在养殖过程的违禁药物监测工作中，主要检测对象以动物尿液为主，其优势在于采样快速、便捷。寻找可活体取样的新型检材一直是

4、兽药残留分析研究的重要方向。近年来，对于动物粪便中抗生素残留检测方法研究已有相应的发展J，但是将动物粪便作为违禁物质残留检测的检材一直未引起足够重视。动物粪便与尿样同样是动物代谢的重要排泄产物，相较于尿样采样偶然性及样品真实性的问题，粪便获得方式更加灵活，据研究显示猪粪便中的药物残留量明显高于猪尿中的残留量，更便于检测，故粪便应作为新型兽药残留分析检材予以关注和深入研究。一受体激动剂类药物相关检测方法已有很多报道¨主要有酶联免疫法(ELISA)⋯J、气相色谱．质谱法(GC—MS)¨’”、液相色谱法(HPLC)14]、离子色谱(IC)”以及液相色谱．串联质谱法(LC—MS／MS)等。ELIS

5、A法因其高通量、灵敏度高的优点主要应用于大量样品的筛查，但方法假阳性率高，只能作为定性初筛。GC—MS方法因其衍生化步骤中衍生化效率的不稳定，影响了检测结果的重现性，LC．MS／MS法因其优异的定量与定性分析能力成为目前最主要的一受体激动剂类药物检测方法。文献已报道的检测样本主要为动物饲料、动物尿液、动物肌肉及内脏组织，净化方法主要为直接提取或者固相萃取净化，前处理步骤较为繁琐。本研究中使用的在线净化液相色谱．串联质谱技术叫结合在线固相萃取，能够实现陕速净化样品，与串联质谱联用，大大提高了方法的便捷性、灵敏度和准确性，有效降低了粪便基质的影响。本研究建立的畜禽粪便中卢．受体激动剂类药物的检

6、测方法简单、快速、灵敏度高，已应用于地区畜牧养殖中违禁药物监管工作中。2014~8-20收稿；2014-10-o8接受本文系上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2Ol1)第4-9号)，上海市市级农口系统青年人才成长计划(沪农青字(2014)第2-2号)资助E-mail：yure@yeah．net1798分析化学第42卷2实验部分2．1仪器与试剂在线净化液相色谱串联质谱仪(美国Therrn0Fisher公司)，由超高效液相色谱仪UltiMate3000和TSQQUNATIVA三重四级杆质谱仪组成，其中包括WPS一3000TRS自动进样器、双三元元梯度泵DGP一3600RS、两位．六通阀切

7、换装置、质谱管理软件The~oXcalibur3．0．49。PL2O2一L电子天平，AB135一S感量为0．00001g电子天平(梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司)；AllegraTMX一22RCentrifuge高速冷冻离心机(美国BeckmanCoulter公司)；MS3B$25漩涡混匀器(德国IKA公司)；MilliporeA10超纯水系统(密理博(上海)贸易有限公司)；亲水FE0．22m针式滤器(上海安谱科学仪