检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.ppt

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1、实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、可溶性还原糖的检测：水浴加热（1）原理：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织。（3）检测过程：刚配制的斐林试剂2mL50～65℃水浴2mL加热2min组织振荡混匀样液呈现浅蓝色变成砖红色（CuO）2还原糖：葡萄糖、果糖和麦芽糖、乳糖、半乳糖实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。①还原糖+斐林试剂砖红色沉淀②脂肪+

2、苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）③蛋白质+双缩脲试剂→紫色④淀粉+碘→蓝色制备组织样液砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃洗净、去皮、切块梨或苹果研磨过滤滤液取5g，放入研钵中（用单层纱布）显色反应向试管中加入向试管中加入1ml振荡混匀50～65℃水2ml组织样液斐林试剂（甲液和浴加热2min乙液等量混合均匀后再注入）观察现象观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。【斐林试剂用法】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/m

3、L的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀，现配现用。且需要水浴加热。二、脂肪的检测（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min制片洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片视野中有橘黄镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的色颗粒圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏

4、丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液橘黄色（或红色）三、蛋白质的检测：（1）原理：蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆（3）检测过程：3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀2ml组织样液2ml双缩脲试剂A液，摇匀观察颜色变化紫色2mL双缩脲试双缩脲试组织剂A2mL剂B3-4滴样液（创造碱性条件）（提供Cu2+）无色紫色四、淀粉的检测：（1）原理：淀粉+碘蓝色（2）选材：马铃薯匀浆（3）检测过程：2滴碘液观察颜色变化2ml组织样液蓝色斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A

5、液B液0.1g/mL0.05g/mL0.1g/mL0.01g/mL成分NaOH溶液CuSO4溶液NaOH溶液CuSO4溶液鉴定可溶性还原糖蛋白质或多肽物质添加甲乙两液等量混匀后立即使用先加入A液1mL，摇匀，再加顺序（现配现用）入B液4滴（不能过量），摇匀反应50～65℃水浴加热不需加热，摇匀即可条件反应样液变砖红色沉淀样液变紫色现象