计算杀灭对数值的时候.doc

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1、计算杀灭对数值的时候,取小数点后两位值,可以进行数字修约。如果消毒试验组消毒处理后平均生产菌落数小于等于1时,其杀灭对数值,即大于等于试验前对照组平均活菌浓度的对数值。(6)有机干扰物质:按30g牛血清白蛋白中加入1000ml蒸馏水的比例配制约100ml,溶解后用0.45um的无菌滤膜进行过滤除菌后使用,未用完的可于2-8℃冰箱中保存。(1)菌试验组:取无菌大试管加入0.5ml菌悬液,再加入0.5ml的有机干扰物质,分别用无菌吸管吸取0.2%的新洁尔灭消毒液4.0ml,加入试管中,迅速混匀并立即计时。待试验菌与0.2%的新洁尔灭消毒液相互作用2.5min时,吸取0.5m

2、l试验菌与消毒剂的混合液,加于4.5ml经灭菌的0.1M硫代硫酸钠-生理盐水溶液中,混匀。试验菌与消毒剂混合液经硫代硫酸钠-生理盐水溶液作用10min后,吸取1.0ml样液,按活菌培养计数测定方法测定存活菌数,每管样液接种2个平皿即可。如果菌液浓度较高时,可进行10倍系列稀释后,在进行活菌培养计数,作为试验组,其计数结果为CX。(2)阳性对照组:用4.0ml磷酸盐缓冲液代替4.0ml0.2%的新洁尔灭消毒液与0.5ml菌悬液、0.5ml有机干扰物质混合2.5min后,取0.5ml混合液与4.5ml0.1M硫代硫酸钠-生理盐水溶液反应,作用10min后。计数方法同试验组,

3、计数结果为C0。 (3)阴性对照组:吸取此次试验用的纯化水0.5ml、0.5ml有机干扰物质、4.0ml磷酸盐缓冲液混匀,混匀后取0.5ml混合液与4.5ml0.1M硫代硫酸钠-生理盐水溶液作用10min后,吸取1.0ml混合液,按活菌培养计数测定方法测定存活菌数,作为阴性对照。 (4)培养:所有用细菌试验的样品均放入30-35℃培养箱中培养,培养48小时观察结果;用真菌试验的样品放入23-28℃培养箱中培养,培养72小时观察结果。4、讨论   4.1由结果可以看出通过中和剂中和效果试验可以确定,每升PBS缓冲液中加入10g组氨酸、50ml吐温-80、5g卵磷脂可以中和

4、新洁尔灭消毒液的消毒效果,因此,在日常消毒中应该避免以上物质的混入。   4.2由消毒剂定量悬浮试验结果可以得出新洁尔灭消毒液能够在10分钟内使所有试验菌的数量至少下降99.99%,说明该消毒剂的消毒效果能达到要求,能够用于使用环境日常的清洁消毒。 5.6 消毒剂对物体表面消毒效果验证  5.6.1消毒剂对物体表面模拟现场鉴定试验 车间用于该消毒剂消毒的物体表面主要有不锈钢设备表面、地面、墙面以及呼吸袋,经过小试,将高浓度菌液(>104cfu/ml)涂抹于不锈钢设备表面、地面、墙面及呼吸袋,选择回收率较高的载体作为物体表面消毒效果试验室部分的试验载体。判断标准:回收菌液

5、浓度:>103cfu/ml。 (1)试验所需要用的试剂 中和剂:活菌计数用培养基:TSA培养基 消毒剂配制用水:纯化水 (2)试验所需要用的仪器 刻度吸管、移液器、电动混匀器、计时器、培养箱、规格板(用不锈钢材料制备,中央留一5.0cm×5.0cm的空格作为采样部位)、无菌棉签、无菌接种环 (3)试验所需要用的菌种 本次试验主要是验证该消毒剂对物体表面微生物的消毒效果,故选择金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌作为试验菌 (4)试验所需要用的消毒液的浓度及作用时间 0.2%的新洁尔灭消毒液作用30s (5)试验所需要用到的场所 微生物实验室阳性间 (6)试验的操作步骤(以浓度为0

6、.2%的消毒剂对金黄色葡萄球菌作用30s为例) 菌悬液:浓度为5×105cfu/ml-5×106cfu/ml 试验组:取大小合适的无菌呼吸袋作为试验样本,将无菌规格板按压在样本上,用无菌棉签沾以菌悬液均匀涂抹被试验表面的6区块(各区块25cm2)。用0.2%的消毒剂对三个区块表面进行喷雾消毒,喷雾的距离约为10cm,以尽量使喷到样本上的雾粒大小和数量一致,消毒后,将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿,分别对3个消毒区块进行涂抹采样,每区块横竖往返各8次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂试管中,电动混匀器上混匀20s,吸取1.0ml上述洗液,按活菌培养计数方法测定存

7、活菌数,每管接种2个平皿,作为试验组,必要时进行稀释。 阳性对照组:从6个区块中选取其他3个区块,用磷酸盐缓冲液代替消毒剂对三个区块表面同法操作,之后将无菌棉签在5ml的中和剂试管中沾湿,分别对3个区块进行涂抹采样,每区块横竖往返各8次。采样后以无菌操作方式将棉签剪入原中和剂中,电动混匀器上混匀20s,吸取1.0ml上述洗液,按活菌培养计数法测定存活菌数,每管接种2个平皿,作为阳性对照组,必要时进行稀释。 阴性对照组:用一只棉签,分别蘸取同批纯化水,以无菌方式将棉签采样端剪入0.1M硫代硫酸钠-生理盐水溶液中,在混匀器上震荡20s,做适当

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