羟基磷灰石涂层材料制备论文.doc

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1、轻基磷灰石涂层材料制备论文（摘要）口的：观察含鋼径基磷灰石作为涂层材料的细胞相容性。方法：将原代培养的成骨细胞接种到涂层表面，采用细胞计数观察第1、7、14、21天细胞在材料表面的附着、增殖情况，采用SEM观察细胞在材料表而的形态变化，并且对21d内细胞的碱性磷酸酶活性进行检测。结果：成骨细胞在材料表面的细胞增殖数与对照组间无显著性斧异，细胞在材料表面伸展良好，粘附牢固，并具有良好的细胞形态及增殖率，碱性磷酸酶活性逐渐增加。结论：含鯛轻基磷灰石涂层材料具有良好的细胞相容性。关键词辆；疑基磷灰石类；涂层；成骨细胞；碱性磷酸酶钛合金表面

2、的生物陶瓷涂层以其优良的牛物学性能已作为种植体材料广泛应用于临床，目前常用的涂层材料为轻基磷灰石，但已有文献报道由于涂层工艺及HA稳是性的问题，使HA涂层在体内迅速溶解而导致种植体的失败（1,2〕。本研究在HA屮添加了稀土元素熊使其晶体更加稳定（3）,同时采用新的涂层工艺，使其在钛合金表面形成稳定和牢固的涂层。在对该涂层材料的细胞毒性进行研究的基础上〔4〕,为进一步观察用含镰I轻基磷灰石涂层后材料的细胞相容性，本实验在体外研究了该涂层材料与成骨细胞间的相互作用，轻基磷灰石涂层材料制备论文（摘要）口的：观察含鋼径基磷灰石作为涂层材料的

3、细胞相容性。方法：将原代培养的成骨细胞接种到涂层表面，采用细胞计数观察第1、7、14、21天细胞在材料表面的附着、增殖情况，采用SEM观察细胞在材料表而的形态变化，并且对21d内细胞的碱性磷酸酶活性进行检测。结果：成骨细胞在材料表面的细胞增殖数与对照组间无显著性斧异，细胞在材料表面伸展良好，粘附牢固，并具有良好的细胞形态及增殖率，碱性磷酸酶活性逐渐增加。结论：含鯛轻基磷灰石涂层材料具有良好的细胞相容性。关键词辆；疑基磷灰石类；涂层；成骨细胞；碱性磷酸酶钛合金表面的生物陶瓷涂层以其优良的牛物学性能已作为种植体材料广泛应用于临床，目前常

4、用的涂层材料为轻基磷灰石，但已有文献报道由于涂层工艺及HA稳是性的问题，使HA涂层在体内迅速溶解而导致种植体的失败（1,2〕。本研究在HA屮添加了稀土元素熊使其晶体更加稳定（3）,同时采用新的涂层工艺，使其在钛合金表面形成稳定和牢固的涂层。在对该涂层材料的细胞毒性进行研究的基础上〔4〕,为进一步观察用含镰I轻基磷灰石涂层后材料的细胞相容性，本实验在体外研究了该涂层材料与成骨细胞间的相互作用，为进一步的体内研究提供了理论和实验依据。1材料与方法1.1含鋼轻基磷灰石涂层材料的制备在直径为10mm,厚1.5mm的钛表面制备含辆轻基磷灰石涂

5、层材料La-HA,将涂层恻片用体积分数(©)为75%乙醇超声振荡清洗后，再用二蒸水超声振荡清洗3遍，烘干，60Co辐射灭菌后备用。1.2成骨细胞的培养本实验应用的成骨细胞来自大鼠颅盖骨，其培养方法见文献⑷。1.3细胞在材料表而附着、增殖将La-HA涂层圆片放入24孔板内，加入lml的DMEM培养液浸泡24h后，将细胞接种于材料表面，浓度为5X107/Lo无涂层圆片的培养板作为对照组；37°C,4)(C02)=5%的条件下用矿化液培养21d,细胞分别在接种后第1、7、14和21天用0.25g/L胰酶0.3ml消化15min,再加0.7

6、ml的DMEM终止消化，充分吹打后，收集消化液。定量后在倒置显微镜下进行细胞计数，每组重复3次，取平均值。1.4细胞在材料表面的碱性磷酸酶活性将上述实验中各时间段的细胞悬液离心、弃上清，加入体积分数为0.3%Triton-X100100ul,4°C过夜，将其移入96孔板内，再加入100U1碱性磷酸酶底物液，37°C孵育40min,加入50卩1的Imol/LNaOH终止反应，在酶联免疫仪上用410nni波长测吸光度，统计分析。1.5细胞在材料表面的形态学观察将培养至第1、7、14、21天的涂层圆片分别取出，用O.Olmol/L的PBS

7、洗3遍，体积分数为0.3%戊二醛固定，乙睛梯度脱水，临界点干燥，喷金，扫描电镜观察。结果.1细胞在材料表面的附着与增殖图1显示出第1、7、14、21天成骨细胞在材料表面附着及增殖的数量统计。可以看出成骨细胞在材料表面附着及增殖情况良好。第21天细胞增殖的数量儿乎是第1天细胞附着数量的6倍。各时间段材料表面的细胞数量与对照组之间无显著差异。・2细胞在材料表面的碱性磷酸酶活性通过测量成骨细胞分泌的碱性磷酸酶活性的相对强弱来表示成骨细胞在材料表面的功能。从第7、14、21天测试的碱性磷酸酶的吸光度可以看出随着培养时间的增加碱性磷酸酶的活性

8、逐渐增强，各时间点与对照组之间无显著弟图1成骨细胞在材料表面附着及增殖数图2成骨细胞在材料表而的碱性磷酸酶活性•3成骨细胞在材料表面形态学观察图3显示扫描电镜下第1、7、14、21天成骨细胞在材料表面的形态。细胞接种在材料表面的第1天