淋巴管标记方法及标志物的探讨（医学论文）.doc

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1、淋巴管标记方法及标志物的探讨【摘要】目的探讨不同标记方法及标志物在淋巴管检测中的价值，为研究肿瘤淋巴管的生成提供理想实验方法。方法用5’核甘酸酶(5，Nase)酶组织化学法对30例正常胃肠新鲜标本(胃及肠组织标本各15例)进行染色观察；用免疫组织化学PV9000法对30例相应胃肠标本石蜡包埋组织行血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)和肾小球足突细胞膜黏蛋白(PodopSnin)染色观察。结果淋巴管密度(LVD):5‘Nase组LVD为6.78±1.16,Podoplanin组为6.85±0.84,VEGFR3组为14.33±2.24oVEGFR3组LVD明显高于5’Nase组及Podo

2、planin组,差异均有显著性(t=7・55、7.49,P<0.01),Podoplanin组与5’Nase组比较差异无显著性(t=0.07,P>0.05)o形态学观察：5’Nase及Podoplanin标记的阳性淋巴管位于黏膜固有层及黏膜下层，管壁较薄，管腔内无红细胞;VEGFR3染色阳性的淋巴管较多，位于黏膜固有层及黏膜下层,部分管壁较厚，管腔内见红细胞，且黏膜肌也呈阳性。染色背景:Podoplanin和VEGFR3免疫组织化学染色背景清晰，能清楚显示阳性淋巴管与周围组织结构的关系；5ZNase染色背景呈淡黄色，无法观察淋巴管周围的组织结构。结论免疫组织化学技术下Podo

3、planin染色可以作为标记淋巴管的理想实验方法°Podoplanin是一种比较特异性的淋巴管标志物。【关键词】淋巴5核昔酸酶血管内皮生长因子受体3肾小球足突细胞膜黏蛋白酶组织化学免疫组织化学[ABSTRACT]ObjectiveTocomparedifferentlymphaticvesselmarkersandlabellingmethodsinordertofindanidealwayforstudyinglymphangiogenesisintumors.MethodsThirtynormalgastrointestinaltissueswerestainedwith5'Nase

4、・TheexpressionofVEGFR3andPodoplaninin30paraffinembeddedsampleswereexaminedusingimmunohistochemistrytechnique・ResultsLymphaticvesseldensity(LVD)wasdifferentwithdifferentstainingmethods:TheLVDofVEGFR3group(14.33±2.24)wassignificantlyhigherthanthatof5’Nasegroup(6.78±1.16)andpodoplaningroup(6.85±0.84

5、)(t=7.55,7.49;P<0.01).Therewasnosigrdficantdifferencebetween5’Naseandpodoplaningroups(t=0.07,P>0・05)・Lymphaticspositivelystainedby5’Naseandpodoplaninwerefoundinlaminapropriaandsubmucosa・Thelymphaticwallswerethinnerandnoredbloodcellswerefoundwithinlymphatics.VEGFR3positivelystainedlymphatics

6、werealsofoundinlaminapropriaandsubmucosa・Partofthelymphaticwallswerethicker,andredbloodcellswerefoundinthelymphticduct.TherewasaclearbackgroundafterpodoplaninandVEGFR3staining,whichclearlyshowedtherelationshipbetweenthelymphaticsandthesurroundingtissue,while5’Nasestainingshowedwheatcolorbackgroun

7、d,whichobscuredthesurroundingtissuestructureofthelymphatics.ConclusionImmunohistochemistrystainingwithpodoplaninwasanidealmethodforlabelingtissuelymphatics・[KEYWORDS]lymphatics;5’Nase;VEGFR3;podoplanin;enzymehistochemi