【生物课件】实验五 霉菌形态及菌落特征的观察.doc

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1、实验五霉菌形态及菌落特征的观察一、目的要求1•掌握观察霉菌形态的基木方法，并观察其形态特征。2.掌握常用的霉菌制片方法二、基本原理霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且他了很容易飞散，所以制标木时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：(Q细胞不变形；(h)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；(c)溶液木身呈蓝色，有一定染色效果。霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌砲了于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。此外，为了得到清晰、完整、保持白然状态的霉菌形态还可利川玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利川玻璃纸的半透

2、膜特性及透光性,将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。三、器材曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicilliumsp・),根霉(Rhizopussp・),毛霉(Mucorsp.)；乳酸石茨酸棉蓝染色液，20%甘汕，杏氏培养基平板，马铃薯培养基；无菌吸管，载玻片，盖玻片，U形棒，解剖刀，玻璃纸，滤纸等。四、操作步骤1.一般观察法于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有抱了的菌丝置染色液屮，再细心地将菌丝挑散开，然示小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡

3、。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。2.载玻片观察法(1)将略小于培养1111底内径的滤纸放入血内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片,然示将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上川L盖，把数套(根据需要而定)如此装置的培养皿叠起,包扎好，用］.05kg/cm2,121.3°C灭菌20分钟或干热灭菌,备用。(2)将6—7ml灭菌的马铃蒋葡萄糖培养基倒入直径为9cm的灭菌平1111屮，待凝固后，用无菌解剖刀切成0・5—lcm2的琼脂块，用刀尖铲起琼脂块放在已灭菌的培养肌内的载玻片上，每片上放置2块。(3)用灭菌的尖细接种针或装有柄的缝衣针，取(肉眼方能看

4、见的)一点霉菌抱了，轻轻点在琼脂块的边缘上，川无菌银了夹看立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上，再盖上皿盖。(1)在培养血的滤纸上，加无菌的20%甘油数毫升，至滤纸湿润即可停加。将培养血叠28°C培养一定时间麻，取出载玻片置显微镜下观察。1.玻璃纸透析培养观察法(1)向霉菌斜面试管中加入5nd无菌水，洙下胞-子，制成砲了悬液。(2)用无菌银了将U灭菌的、肓径与培养川［相同的圆形玻璃纸覆盖于杏氏培养基平板上。(3)用1ml无菌吸管吸取0・2ml砲了悬液于上述玻璃纸平板上，并用无菌玻璃刮棒涂抹均匀。(4)置28°C温室培养48小时后，取出培养111L,打开1111盖，用银

5、了将玻璃纸与培养基分开，再用剪刀剪取一小片玻璃纸置载玻片上，用显微镜观察。五、实验报告1.结果绘图说明你所观察到的霉菌形态特征。2.思考题(1)比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌形态上的异同。(2)玻璃纸丿卫怎样进行灭菌？为什么？